МЕТОД проточнОЙ цитометриИ В ДиагностикЕ диссеминированных опухолевых клеток в костном мозге У БОЛЬНЫХ ракОМ молочной железы
Источник:
1 ФГБОУ ВПО Ульяновский государственный университет2 ГУЗ Областной клинический онкологический диспансер3 ФГБУ «Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина» Статья в формате PDF 261 KB
Диагностика гематогенного распространения эпителиальных опухолей на ранних стадиях – одна из главных проблем современной онкологии. В клинической практике пока не найдено рутинных методов обнаружения микрометастазов. Морфологически единичные разрозненные опухолевые клетки не определяются – требуется применение высокочувствительных иммунологических методов. Накапливаются данные о том, что количественное определение и характеристика диссеминированных опухолевых клеток позволяет получить важную прогностическую информацию и проводить мониторинг эффективности терапии. Для того чтобы контролировать эффективность воздействия лекарственных средств на микрометастазы нужно, в первую очередь, стандартизировать методы количественной оценки единичных диссеминированных опухолевых клеток.
Целью настоящей работы явилось установление степени гематогенной диссеминации у больных раком молочной железы (РМЖ) на основании обнаружения диссеминированных опухолевых клеток в костном мозге методом проточной цитометрии с применением моноклональных антител к эпителиальным антигенам.
Материалы и методы исследования. В работе использованы материалы клинического, морфологического, иммуноцитологического обследования 38 больных РМЖ, находящихся на лечении в ГУЗ Областной клинический онкологический диспансер г. Ульяновска с ноября 2011 г. по настоящее время. В исследуемую группы вошли женщины в возрасте от 33 до 74 лет. Средний возраст составил 56 ± 10,0 лет. На момент постановки первичного диагноза пациентки распределились по стадиям следующим образом: I стадия была диагностирована у 3 (7,9 %) больных, IIА – у 11 (29,0 %), IIВ – у 3 (7,9 %), IIIА – у 7 (18,4 %), IIIВ – у 3 (7,9 %), IIIC – у 6 (15,8 %) и IV – у 5 (13,1 %) пациенток. Наиболее частым гистологическим вариантом был инфильтративный смешанный рак (42,9 %). Отмечена достаточно высокая частота инфильтративного протокового рака (28,6 %). Реже встречались инфильтративный дольковый рак (21,4 %) и другие формы рака (медуллярный, папиллярный, тубулярный) – 7,1 %. Больным было проведено стандартное клиническое обследование. Исследование костного мозга до начала лечения выполнялось как стандартными цитологическим и гистологическим методами, так и методом проточной цитометрии с применением моноклональных антител к цитокератинам EpCAM (CD326). Материал для цитологического исследования и проточной цитометрии получали с помощью стернальной пункции. Объем костномозгового пунктата не превышал 0,5 мл, т.к. при большем объеме возможно разбавление образца периферической кровью. Проточная цитометрия проводилась на базе лаборатории иммунологии гемопоэза ФГБУ «Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина» РАМН (руководитель – д.м.н., проф. Н.Н. Тупицын). Исследование проводилось в координатах CD45/CD326. Предварительно было проведено иммуномагнитное обогащение клеток, связывающих антитела CD326 (EpCAM). Это позволило оценивать до 50 млн миелокариоцитов у одного больного. Для сравнения, иммуноцитологически на цитоцентрифужных препаратах можно оценить обычно 1–2 млн. миелокариоцитов. Подсчет клеточности костного мозга и анализ миелограмм производился в клинической лаборатории. Для гистологического исследования выполнялась трепанбиопсия задне-верхней ости подвздошной кости с двух сторон.
Результаты исследования. При стандартном цитологическом исследовании метастазы в костный мозг были выявлены у 1 (2,6 %) из 38 больных. Это пациентка, у которой IV клиническая стадия была установлена до обнаружения метастатических клеток в костном мозге (T4N3cM1, метастазы в печень, плевру). При гистологическом исследовании трепанобиоптатов подвздошной кости у данной больной было выявлено двухстороннее поражение костного мозга. В другом случае исходная стадия заболевания была расценена как IIIC (T4N3aM0), после гистологического обнаружения метастазов в костный мозг было проведено рестадирование – стадия была изменена на IV. При дополнительной остеосцинтиграфии у этой пациентки были выявлены множественные остеопластические метастазы в кости, не подтвержденные рентгенологически. У обеих пациенток метастазы в костный мозг подтверждены с помощью метода проточной цитометрии. Кроме того, у 8 из 38 больных в трепанобиоптатах были обнаружены единичные плазматические клетки или микроочаговое их скопление, что является косвенным признаком поражения костного мозга. При проточной цитометрии у 2 из этих 8 пациенток были обнаружены микрометастазы.
Единичные эпителиальные (опухолевые) клетки в образцах костного мозга были выявлены у 35 (92,1 %) из 38 пациенток с помощью проточной цитометрии с применением моноклональных антител ЕрСАМ (CD326). Важно то, что количество опухолевых клеток, определяемых иммуноцитологически, было очень низким и в 77,1 % случаев составило менее 1 клетки на 1 млн миелокариоцитов. Лишь у 8 (22,9 %) из 35 больных было выявлено от 1 до 10 (в одном случае − 44) эпителиальных клеток на 1 млн миелокариоцитов. У 1 из 8 пациенток была диагностирована I стадия заболевания, у трех пациенток – IIA стадия. У остальных четырех пациенток была установлена IV стадия РМЖ (T4N3сM1), при этом у двух из них было выявлено метастатическое поражение костного мозга в трепанобиоптатах.
Если считать положительной реакцию при наличии 1 метастатической клетки среди 1 миллиона мононуклеарных клеток (МНК) костного мозга (сумма количества лимфоцитов, моноцитов и плазматических клеток), то число таких пациенток составило 31 (88,6 %) из 35. При этом только у 4 (11,4 %) из 35 больных число клеток было ≥ 10. У трех больных было выявлено наибольшее число клеток на 1 млн. МНК – 32, 35 и 330, соответственно. Четкий кластер опухолевых клеток – микрометастаз – при проведении проточной цитометрии был диагностирован у 4 (10,5 %) из 38 пациенток. При этом в 3 из 4 случаев число клеток в образцах костного мозга было очень низким и составило менее 1 клетки на 1 млн миелокариоцитов. Таким образом, метод проточной цитометрии в сочетании с иммуномагнитным обогащением популяции опухолевых клеток позволил диагностировать микрометастазы у 11 (28,9 %) из 38 больных.
Рядом ученых было показано, что количество рецидивов рака молочной железы резко возрастает при обнаружении в костном мозге 10 или 15 изолированных опухолевых клеток. В нашем исследовании не была прослежена общая и безрецидивная выживаемость в связи с небольшим сроком от начала исследования. Выявленные изменения в миелограммах пока не показали ассоциации этих признаков с присутствием отдельных опухолевых клеток в костном мозге. Работа в данном направлении будет продолжена.
Выводы. Возможность выявления единичных опухолевых клеток в костном мозге вследствие большей чувствительности является главным преимуществом метода проточной цитометрии в диагностике диссеминированных опухолевых клеток рака молочной железы в костном мозге по сравнению с морфологическими методами исследования: в 11 (28,9 %) и 2 (5,2 %) случаях из 38, соответственно. В тоже время обнаружение малого количества опухолевых клеток сложно трактовать в тех случаях, где они не формируют четкого кластера. При наличии такого кластера микрометастазы могут быть констатированы даже при наличии менее 1 опухолевой клетки на 1 миллион миелокариоцитов. Нет четких данных о том, какова «критическая» опухолевая нагрузка костного мозга, превышение которой было бы связано с ростом частоты рецидива заболевания. Получение ответов на эти вопросы станет важным шагом на пути к индивидуализации антиметастатической терапии.
Отзывы (через Facebook):
Оставить отзыв с помощью аккаунта FaceBook:
Статья в формате PDF 111 KB...
18 01 2021 20:28:19
Статья в формате PDF 112 KB...
17 01 2021 14:20:16
Статья в формате PDF 121 KB...
16 01 2021 15:48:52
Статья в формате PDF 162 KB...
15 01 2021 18:47:43
Статья в формате PDF 316 KB...
14 01 2021 14:42:34
Статья в формате PDF 80 KB...
13 01 2021 0:35:48
Статья в формате PDF 119 KB...
11 01 2021 15:17:49
Статья в формате PDF 113 KB...
09 01 2021 17:13:36
Статья в формате PDF 117 KB...
08 01 2021 13:59:46
Статья в формате PDF 150 KB...
07 01 2021 21:34:34
Статья в формате PDF 342 KB...
06 01 2021 17:53:28
Статья в формате PDF 279 KB...
05 01 2021 1:58:50
Статья в формате PDF 87 KB...
04 01 2021 12:33:15
Статья в формате PDF 125 KB...
03 01 2021 1:18:30
Статья в формате PDF 100 KB...
01 01 2021 23:38:17
Статья в формате PDF 90 KB...
31 12 2020 22:38:11
Статья в формате PDF 101 KB...
30 12 2020 15:10:28
Статья в формате PDF 127 KB...
29 12 2020 1:28:48
Статья в формате PDF 119 KB...
28 12 2020 10:41:17
Статья в формате PDF 137 KB...
27 12 2020 11:39:32
Статья в формате PDF 116 KB...
26 12 2020 23:26:31
Статья в формате PDF 93 KB...
24 12 2020 10:22:38
Статья в формате PDF 124 KB...
23 12 2020 9:53:28
Статья в формате PDF 306 KB...
20 12 2020 21:52:29
Статья в формате PDF 173 KB...
19 12 2020 19:50:10
Статья в формате PDF 111 KB...
17 12 2020 3:45:40
Статья в формате PDF 130 KB...
16 12 2020 4:43:18
Статья в формате PDF 105 KB...
15 12 2020 16:34:58
Статья в формате PDF 185 KB...
14 12 2020 7:51:55
Статья в формате PDF 164 KB...
12 12 2020 6:31:38
Статья в формате PDF 126 KB...
11 12 2020 5:36:26
Статья в формате PDF 104 KB...
10 12 2020 17:58:23
Применение хитинсодержащих препаратов оказывает положительное влияние на мясную продуктивность бычков, а превосходство по характеристикам химического состава и энергетической ценности мякоти имеют бычки, получавшие сукцинат хитозана. ...
09 12 2020 19:24:55
Статья в формате PDF 113 KB...
08 12 2020 11:57:28
Статья в формате PDF 97 KB...
07 12 2020 13:51:59
Географическое расположение и климатические условия Нижнего Поволжья, неудовлетворительная экологическая обстановка способствует росту заболеваемости мочеполовой системы у населения, проживающего в регионе. Увеличение частоты заболеваемости уратным нефролитиазом диктует необходимость поиска адекватного объема терапии по улучшению качества консервативного лечения этой патологии. Изучение особенностей симптомокомплекса уратного нефролитиаза в разных возрастных группах (25-30; 40-45; 60-70 лет) позволило научно обосновать и разработать практические рекомендации по рациональному и эффективному лечению данного вида мочекаменной болезни у пациентов с учетом их возраста. ...
06 12 2020 20:39:44
Статья в формате PDF 119 KB...
04 12 2020 0:39:48
Статья в формате PDF 189 KB...
03 12 2020 9:20:39
Статья в формате PDF 542 KB...
02 12 2020 17:35:23
Статья в формате PDF 122 KB...
01 12 2020 1:28:33
Статья в формате PDF 114 KB...
30 11 2020 16:56:32
Статья в формате PDF 396 KB...
29 11 2020 10:59:30
Статья в формате PDF 315 KB...
28 11 2020 20:26:23
Статья в формате PDF 108 KB...
25 11 2020 5:20:59
Статья в формате PDF 102 KB...
24 11 2020 13:47:12
Статья в формате PDF 109 KB...
23 11 2020 3:54:22
Статья в формате PDF 133 KB...
22 11 2020 20:55:10
Статья в формате PDF 276 KB...
21 11 2020 0:15:26
Статья в формате PDF 276 KB...
20 11 2020 19:12:54
Статья в формате PDF 343 KB...
19 11 2020 12:37:16
В статье описывается математическая модель, связывающая уровень психической реакции с личностными характеристиками человека и с силой информационного воздействия на него. Исследуются условия устойчивости модели методами теории автоматического управления. ...
18 11 2020 18:52:28
Статья в формате PDF 163 KB...
17 11 2020 21:30:21
Статья в формате PDF 294 KB...
16 11 2020 23:26:36
Статья в формате PDF 104 KB...
15 11 2020 13:54:49
Статья в формате PDF 291 KB...
14 11 2020 17:36:24
Статья в формате PDF 99 KB...
13 11 2020 9:44:31
Статья в формате PDF 293 KB...
11 11 2020 4:15:14
Статья в формате PDF 189 KB...
10 11 2020 5:59:32
Статья в формате PDF 284 KB...
09 11 2020 0:31:25
Статья в формате PDF 98 KB...
08 11 2020 6:26:12
Статья в формате PDF 171 KB...
07 11 2020 14:46:42
Статья в формате PDF 108 KB...
06 11 2020 5:12:28
Статья в формате PDF 103 KB...
03 11 2020 11:55:55
Статья в формате PDF 160 KB...
02 11 2020 17:58:14
Статья в формате PDF 130 KB...
31 10 2020 4:33:49
Статья в формате PDF 142 KB...
30 10 2020 22:15:20
По результатам измерений ширины годичных слоев на рабочей части керна и определения радиального роста дерева, и последующей идентификации по ним статистической закономерности, выполняют прогнозирование на ретроспективу на число лет с начала рабочей зоны керна до момента начала жизни измеряемого учетного дерева. ...
29 10 2020 5:55:54
Статья в формате PDF 132 KB...
28 10 2020 11:53:47
Статья в формате PDF 118 KB...
27 10 2020 2:23:48
Статья в формате PDF 269 KB...
26 10 2020 20:39:14
Статья в формате PDF 262 KB...
25 10 2020 12:15:40
Статья в формате PDF 117 KB...
24 10 2020 20:57:13
Статья в формате PDF 124 KB...
23 10 2020 18:27:37
Статья в формате PDF 143 KB...
22 10 2020 14:21:27
Статья в формате PDF 136 KB...
21 10 2020 11:14:20
Статья в формате PDF 306 KB...
20 10 2020 23:10:36
Статья в формате PDF 133 KB...
19 10 2020 10:23:44
Статья в формате PDF 140 KB...
18 10 2020 12:28:30
Статья в формате PDF 286 KB...
17 10 2020 2:37:46
Статья в формате PDF 136 KB...
16 10 2020 6:51:55
Статья в формате PDF 88 KB...
15 10 2020 3:29:39
Статья в формате PDF 276 KB...
14 10 2020 14:36:10
Статья в формате PDF 114 KB...
13 10 2020 2:32:36
Проведено комплексное психо-соматическое обследование 3280 женщин репродуктивного возраста с мастопатией. Сделан вывод о необходимости организации специализированных маммологических кабинетов для квалифицированной диагностики, лечения и психологической коррекции пациенток с заболеваниями молочных желез. ...
11 10 2020 3:48:42
Статья в формате PDF 391 KB...
10 10 2020 17:35:29
Статья в формате PDF 122 KB...
09 10 2020 11:38:46
Статья в формате PDF 100 KB...
08 10 2020 2:12:45
Цитомегаловирусная инфекция ( Ц М В И) относится к числу самых распространенных вирусных заболеваний. Наиболее уязвимыми являются плод и новорожденный. Целью данного исследования явилась ранняя диагностика нарушений внутриутробного состояния плода у беременных с Ц М В И. Благодаря разработке новой ультразвуковой аппаратуры, основанной на эффекте Допплера проводились исследования кровотока в магистральных сосудах, а именно маточных артериях. Согласно поставленной цели по разработанной нами методике были рассмотрены анкеты клинико-лабораторного исследования у беременных с Ц М В И. Всего обследовано 115 женщин с различными сроками беременности и 40, составляющих контрольную группу. Из общего числа беременных у 64 (55,7 %) Ц М В И протекала в легкой форме, первично-латентную инфекцию наблюдали у 48 (41,7 %) пациенток. Ультразвуковое сканирование проводилось в разные сроки беременности, преимущественно во II-III триместрах, однако, по показаниям в некоторых случаях У З И осуществляли и в более ранние сроки. Исследование проводилось на аппарате «Aloka» 1700 SSD с допплерометрическим блоком пульсирующей волны, с использованием трансдьюсеров 3,5 и 5 м Гц и трансвагинальным датчиком 6,5 м Гц. При допплерографии в акушерстве применяется качественный анализ кривых скоростей кровотока ( К С К). Определяются систоло-диастолическое соотношение ( С Д О), индекс резистентности ( И Р), пульсовый индекс ( П И). В нашем исследовании наиболее неблагоприятным признаком явилось появление дикротической выемки на фоне двухстороннего нарушения маточно-плацентарного кровотока. У беременных с латентной формой Ц М В И нами выявлена также ассиметрия маточно-плацентарного кровотока. Изменение кровотока в правой М А более выражено, что, по-видимому связано с наличием плацентации одноименной стороны. Снижение маточно-плацентарного кровотока в правой М А постепенно приводит к снижению в левой М А, и связано с наличием морфологических изменений в плаценте. Более выраженные нарушения маточно-плацентарного кровотока встретились у беременных с С З Р П. Из этого следует, что основная причина гипотрофии – это нарушение маточно-плацентарного кровотока. ...
07 10 2020 15:23:38
Статья в формате PDF 110 KB...
06 10 2020 5:51:32
Статья в формате PDF 134 KB...
05 10 2020 6:45:47
Статья в формате PDF 161 KB...
04 10 2020 2:14:12
Статья в формате PDF 111 KB...
03 10 2020 16:44:23
Статья в формате PDF 112 KB...
02 10 2020 5:22:24
Статья в формате PDF 89 KB...
01 10 2020 22:38:15
Статья в формате PDF 128 KB...
30 09 2020 5:37:17
Статья в формате PDF 107 KB...
29 09 2020 6:22:23
Статья в формате PDF 110 KB...
28 09 2020 5:49:58
Статья в формате PDF 138 KB...
27 09 2020 8:51:23
Методика диагональной сегментарной амплитудометрии, заключающаяся в регистрации амплитуды колебаний активного и реактивного сопротивления тканей человеческого организма, широко используемая в медицинской практике, начинает применяться в спорте для контроля за функциональным состоянием спортсменов в различные периоды учебно-тренировочного процесса. Результаты, полученные данным методом, показывают, что различия в проводимости тканей определяются видом спорта, а также квалификацией спортсменов. Проводимость тканей более устойчива в подготовительный период по сравнению с соревновательным. Суммарная нестабильность проводимости тканей выше на соревнованиях более высокого уровня. ...
26 09 2020 7:52:18
Статья в формате PDF 94 KB...
25 09 2020 23:48:28
Статья в формате PDF 151 KB...
24 09 2020 0:49:24
Статья в формате PDF 90 KB...
23 09 2020 14:21:43
Статья в формате PDF 331 KB...
22 09 2020 23:19:31
Рассмотрены некоторые проблемы идентификации моделей распределения данных, при использовании современного математического аппарата для решения этой задачи. Показано, что использование методов нелинейной оптимизации для идентификации моделей приводит к улучшению результатов идентификации, но одновременно, изменяет формальную постановку задачи. Выделено три группы проблем, связанных с выбором критериев согласия, их критических значений и проверкой адекватности получаемых моделей. Проанализированы возможные подходы к решению этих проблем. ...
21 09 2020 18:56:42
Статья в формате PDF 139 KB...
20 09 2020 13:58:54
Статья в формате PDF 253 KB...
19 09 2020 15:44:42
Статья в формате PDF 132 KB...
17 09 2020 1:51:10
Статья в формате PDF 110 KB...
16 09 2020 14:30:48
Статья в формате PDF 307 KB...
14 09 2020 18:58:26
Статья в формате PDF 149 KB...
13 09 2020 7:35:25
Статья в формате PDF 128 KB...
12 09 2020 9:43:14
Статья в формате PDF 268 KB...
11 09 2020 20:56:35
Статья в формате PDF 100 KB...
10 09 2020 2:56:54
Статья в формате PDF 300 KB...
09 09 2020 6:14:30
Статья в формате PDF 256 KB...
08 09 2020 12:15:10
Статья в формате PDF 286 KB...
07 09 2020 5:22:26
Статья в формате PDF 262 KB...
06 09 2020 5:52:38
Статья в формате PDF 214 KB...
05 09 2020 4:26:11
Статья в формате PDF 109 KB...
04 09 2020 2:42:18
Статья в формате PDF 101 KB...
03 09 2020 0:25:57
Малоизученным направлением в диагностике психосоматических заболеваний является исследование физико-химических характеристик крови. Методы, применяемые в диагностике и контроле лечения психосоматических заболеваний в целом, и задержке психического развития в частности ( З П Р), являются достаточно субъективными. Во многом это обусловлено отсутствием однозначных лабораторно-диагностических методов, позволяющих осуществлять диагностику на ранних этапах заболевания. Целью нашего исследования явилось изучение особенностей И К – спектра сыворотки крови детей подросткового возраста. В качестве субстрата для исследования использовали сыворотку крови больных детей, которую затем подвергали И К-спектроскопии с регистрацией спектров поглощения в области 3500-963 см-1. Исследована сыворотка крови 30 детей с диагнозом З П Р и 30 здоровых, сопоставимых по возрасту и полу. Было проведено сравнение И К-спектра сыворотки крови больных с З П Р и здоровых доноров. Достоверно выявлена разница показателей инфракрасной спектрометрии в норме и патологии, а так же проверена эффективность применяемой терапии. Таким образом, с помощью И К-спектрометрии установлены особенности спектров сыворотки крови детей подросткового возраста и выявлены отличия в спектре у детей с З П Р и динамические изменения в процессе лечения, что может использоваться для диагностики данной патологии, а так же для контроля за эффективностью проводимого лечения. ...
02 09 2020 12:58:43
Химиотерапевтические средства в комплексе с хирургическими операциями широко используются для лечения онкологических больных. Несмотря на то, что арсенал этих препаратов широко представлен, все эти препараты обладают высокой токсичностью. Результаты цитогенетических исследований, проводимых на семенах пшеницы безостая – 1 показали, что 0,01; 0,02 и 0,05 % растворы исследуемого вещества не обладают цитотоксичностью, и лишь в разведении 0,1 % обнаруживает слабое цитотоксическое действие. Методом биотеста было выявлено, что при внутрибрюшинном введении белым мышам 1 мл раствора 4-аммоний пиридин тетрахлорпалладита исследуемое вещество обнаруживает высокую токсичность, которая усиливается со времени, начиная с момента введения, и зависит от концентрации введенного раствора. ...
01 09 2020 5:17:42
Статья в формате PDF 113 KB...
31 08 2020 17:18:11
Статья в формате PDF 136 KB...
30 08 2020 10:23:25
Статья в формате PDF 84 KB...
28 08 2020 23:13:43
Статья в формате PDF 138 KB...
27 08 2020 2:35:46
Статья в формате PDF 111 KB...
26 08 2020 4:27:56
Статья в формате PDF 115 KB...
25 08 2020 16:21:38
Статья в формате PDF 433 KB...
23 08 2020 1:40:48
Статья в формате PDF 282 KB...
22 08 2020 13:53:31
Еще:
Обзоры -1 :: Обзоры -2 :: Обзоры -3 :: Обзоры -4 :: Обзоры -5 :: Обзоры -6 :: Обзоры -7 :: Обзоры -8 :: Обзоры -9 :: Обзоры -10 :: Обзоры -11 ::
Последовательность подготовки научной работы может быть такой: