СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ МЕТОДОВ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ ЛИСТЕРИОЗА БЕРЕМЕННЫХ И НОВОРОЖДЕННЫХ
Медицинские проблемы листериоза определяются: возрастающей ролью листерий в перинатальной и неонатальной патологии, способностью возбудителя вызывать тяжелую, часто смертельную инфекцию при снижении уровня клеточного иммунитета восприимчивой популяции. Снижение уровня клеточного иммунитета во время беременности, особенно в поздние сроки, обусловливает повышение восприимчивости к листериозной инфекции у данной группы риска, вызывая выкидыши, мертворождение, пороки развития плода и т.д. В целом беременные заболевают листериозом в 20 раз чаще, чем здоровые люди, и около 35% всего зарегистрированного листериоза наблюдалось во время беременности. Так, в США листериоз у беременных женщин составляет около 27% от общего числа заболевших этой инфекцией и около 60% случаев приходится на возраст от 10 до 40 лет. Смертность при листериозе беременных женщин и новорожденных достигает 30-50% [Тартаковский И.С., 2002; Омарова С.М., 2007].
Диагностирование листериоза у беременных и новорожденных основывается на данных акушерского анамнеза (выкидыши, недонашивание, мертворождение) и результатах лабораторно-клинического обследования матери и ребенка.
В настоящее время в связи с развитием молекулярно-биологических методов диагностики (ПЦР, ЛЦР и др.) становится целесообразным обследование беременных женщин наряду с известными инфекциями и на листериоз, особенно для женщин с отягощенным акушерским анамнезом.
Одним из важных этапов совершенствования эпидемиологического мониторинга и диагностики листериоза в России является разработка новых и усовершенствование существующих отечественных иммунобиологических препаратов для выделения и идентификации листерий. Это позволит в полной мере реализовать современные схемы индикации L.monocytogenes, в соответствии с международными требованиями и стандартами [Тартаковский И.С., 2002; Омарова С.М., 2007].
В России число выявленных больных листериозом невелико (до 100 случаев ежегодно), что, вероятно, связано с отсутствием надежных методов бактериологической диагностики и эффективной системы эпидемиологического мониторинга инфекции.
Для изучения перинатальных факторов риска инфицирования листериями матери и плода, а также с целью установления причин патологии и смертности среди детей в перинатальном и младенческом возрасте было проведено обследование беременных женщин и новорожденных. Изучение клинического материала от беременных с подозрением на листериоз проводили с использованием комплекса лабораторных методов - бактериологического, серологического и молекулярно-генетического, для повышения процента выявляемости возбудителя.
С помощью бактериологического метода, РПГА, ИФА и ПЦР обследовано 352 беременные женщины, роженицы и родильницы, находившиеся на учете в кабинете бесплодия женской консультации №1 и 132 новорожденных Перинатального центра г. Махачкала.
Во всех случаях клинического проявления инфекции при посеве исследуемого материала на разработанную селективную средудля выделения листерий САЛ-1 через 18±2 ч инкубации при температуре 37±1°С вырастали типичные серовато-зеленые колонии с темным центром в S-форме, d=1,7±0,2 мм. Колонии были окружены характерным коричнево-черным ореолом.
Из изученного клинического материала выделено и идентифицировано до вида 19 культур L.monocytogenes (17,2%). Листерии выделялись достоверно чаще (р=0,001) со слизистой оболочки влагалища (67,4%), чем из цервикального канала (23,3%); реже из зева (1,3%). Изолированные штаммы L.monocytogenes были типированы в реакции агглютинации (РА) и отнесены к сероварам: 4в, 1/2а и 1/2с. Принадлежность 19 изолятов к виду L.monocytogenes подтверждена молекулярно-биологическим методом в полимеразной цепной реакции (ПЦР) с видоспецифическими праймерами.
Колонии листерий, выросшие на разработанной селективной среде, изучены по биохимическим тестам с помощью микротестсистемы МТС-12Л. Все выделенные культуры L. monocytogenes ферментировали с образованием кислоты без газа глюкозу, маннозу, рамнозу, эскулин, не ферментировали маннит, ксилозу, лактозу, арабинозу, что соответствует биохимическим особенностям листерий.
Изучение факторов патогенности изолированных из клинического материала листерий осуществляли путем определения в - гемолитической и лецитиназной активности. Сравнительное изучение в - гемолитической активности, являющейся показателем вирулентности, проводили с использованием в качестве контроля тест-штаммов листерий обладающих гемолитической активностью. В результате установлено, что выделенные культуры обладали характерной для патогенного вида L.monocytogenes в - гемолитической активностью.
Как известно, сочетание признаков положительной гемолитической активности и ферментации рамнозы при отсутствии сбраживания ксилозы указывают на патогенность культур листерий, т.е. на возможность их участия в патологическом процессе.
Наряду с исследованием клинического материала от беременных изучены лабораторные образцы от 132 новорожденных ребенка, которые представляли группу риска по развитию внутриутробной инфекции (ВУИ). Ребенка рассматривали как инфицированного, если маркеры изученных инфекций были обнаружены, по крайней мере, в одном из полученных от него образцов клинического материала. Анализ полученных данных показал, что ДНК изученных инфекций выявлена во всех группах, в том числе у детей без признаков ВУИ. Так, наиболее часто ДНК ЦМВ выявлялась в группе обследованных в возрасте 1-2 месяцев, даже значительно чаще, чем у новорожденных с ВУИ, обследованных на первой неделе жизни, а ДНК листериозной инфекции чаще выявлялись в группе новорожденных обследованных на первой неделе жизни, чем в группе новорожденных в возрасте 1-2 месяцев.
Бактериологическим методом кроме листерий была выявлена сопутствующая микрофлора. Из представителей бактериальной флоры чаще выделяли энтеробактерии - 73,5%; грибы рода Candida в 6,5%; бактерий других родов в 12,8%. Кроме того клинические образцы ДНК, выделенные из соскобов эпителиальных клеток цервикального канала и влагалища были проанализированы ПЦР методом на наличие специфических фрагментов - U.urealyticum, M.genitalium, C.trachomatis, T.vaginalis, HCMV, HSV (1 и 2 типов), HPV (16 и 18 типов), при помощи ПЦР. В 31% случаев выявлялись хламидии, трихомонады - 25%, папиллома вирус человека - 11%, гонококки - 11%, уреаплазмы - 8%, вирус простого герпеса - 5%.
Результаты исследования клинического материала показали, что наряду с листериями у обследованных с акушерской патологией выявляли условно-патогенные энтеробактерии и специфические инфекции, обладающие факторами, определяющими возможность их участия в патогенезе заболевания.
Штаммы L.monocytogenes, выделенные от беременных женщин и новорожденных (всего 26) были протестированы (in vitro) на чувствительность к антибактериальным препаратам. Наиболее высокую чувствительность выделенные культуры проявляли к антибиотикам цефалоспоринового ряда четвертого и третьего поколения (так 81,4% штаммов показали чувствительность к цефтриаксону, 79,1% - к цефаклору, 74,3% - к цефазолину и 73,8% - к цефамезину, 68,1%-к цефалотину). На втором месте по эффективности оказались фторхинолоны (85,3% штаммов были чувствительны к ципрофлоксацину). На третьем месте по эффективности оказались нитрофураны (63,6%, выделенных штаммов имели к ним чувствительность). Листерии, выделенные в ходе настоящего исследования, были высокочувствительны к линезолиду (МИК составляла 60,0 мкг/мл) и рифампицину (62,5% штаммов); 22,8% штаммов показали чувствительность к гентамицину, 27,9% - к ампициллину. К препаратам других групп, чувствительность проявлялась реже (р <0,05).
В итоге, ни один препарат, не показал 100% эффективности (in vitro) к протестированным штаммам листериям, из чего следует, что необходимо проводить комплексную антибиотикотерапию листериоза - несколькими препаратами. Причем выбор препаратов должен осуществляться из вышеперечисленных групп и, только по результатам антибиотикограммы. У 1,4% клинических штаммов L.monocytogenes наблюдалась резистентность к антибиотикам.
Как известно, важным аспектом проведенного этиотропного лечения является контроль критерия излеченности - это улучшение клиники листериоза у беременных; исчезновение характерных признаков, в частности угрозы прерывания и признаков воспаления - боли, выделения; исчезновение листерий при микроскопическом и бактериологическом исследовании мазков; исход родов и т.д.
Результаты бактериологических исследований с применением новых отечественных селективных питательных сред, обладающих высокой чувствительностью и специфичностью в отношении роста культур рода Listeria, подтвержденных методами ПЦР диагностики, РНИФ и РПГА определяют целесообразность проведения комплексного обследования клинического материала тремя и более методами, которое повышает диагностическую эффективность микробиологической диагностики листериоза среди беременных и новорожденных.
Отзывы (через Facebook):
Оставить отзыв с помощью аккаунта FaceBook:
Статья в формате PDF 104 KB...
11 12 2019 19:52:37
Статья в формате PDF 86 KB...
10 12 2019 8:43:14
Учебный предмет география состоит из двух блоков. Физическая география изучает элементы природы как единое целое, формирует “образ территории”. Социально-экономическая география рассматривает развитие общества и экономики в тесной взаимосвязи с природными условиями. Для формирования и поддержания интереса к географии в Ф Т Л № 1 широко используются современные информационные технологии. Компьютерное тестирование систематически используется на уроках. Лицеисты успешно участвуют в различных телекоммуникационных олимпиадах - индивидуальных и групповых конкурсах с использованием электронной почты и сети Интернет. Такие проекты развивают умение работать с различными источниками информации, способствуют межпредметной интеграции знаний и формированию целостной картины мира. ...
08 12 2019 7:34:25
Статья в формате PDF 133 KB...
07 12 2019 12:47:14
Статья в формате PDF 132 KB...
06 12 2019 20:34:58
Статья в формате PDF 111 KB...
05 12 2019 15:48:41
Статья в формате PDF 110 KB...
04 12 2019 17:40:54
Рассматриваются показатели видового разнообразия мелких млекопитающих в зоне влияния алмазодобывающей промышленности Западной Якутии. Исследования проводились на территории двух крупных промышленных узлов – Мирнинского (среднетаежная подзона) и Айхало- Удачнинского (северотаежная подзона). Отработано около 7040 конусо-суток, 4700 ловушко-суток и отловлено 1920 экз. мелких млекопитающих, относящихся к 17 видам. Отмечено, что при масштабных преобразованиях ландшафтов, характерных для деятельности предприятий горнодобывающей промышленности, происходят изменения состава сообществ и популяционных параметров мелких млекопитающих, что свидетельствует о пессимизации среды обитания. Причем негативные трансформации более резко выражены в пределах северотаежной подзоны. ...
03 12 2019 9:41:11
Статья в формате PDF 192 KB...
02 12 2019 12:25:55
Статья в формате PDF 252 KB...
01 12 2019 11:12:42
Статья в формате PDF 113 KB...
30 11 2019 21:54:28
Статья в формате PDF 124 KB...
28 11 2019 9:46:27
Статья в формате PDF 113 KB...
26 11 2019 1:23:16
Статья в формате PDF 96 KB...
25 11 2019 3:17:44
Статья в формате PDF 111 KB...
24 11 2019 22:48:15
Статья в формате PDF 163 KB...
23 11 2019 1:14:44
Статья в формате PDF 99 KB...
21 11 2019 21:17:36
Статья в формате PDF 154 KB...
20 11 2019 23:38:40
Статья в формате PDF 108 KB...
19 11 2019 11:50:14
Статья в формате PDF 131 KB...
18 11 2019 20:47:24
Статья в формате PDF 115 KB...
16 11 2019 0:15:37
Статья посвящена актуальной проблеме – влиянию хронической алкогольной интоксикации на изменение морфоструктуры селезенки. Дана сравнительная гистологическая характеристика соединительно-тканного каркаса и белой пульпы селезенки у животных в эксперименте и у человека. Представлены дегенеративные изменения гистологической структуры селезенки. ...
15 11 2019 1:13:22
Статья в формате PDF 97 KB...
14 11 2019 2:20:56
Статья в формате PDF 127 KB...
13 11 2019 5:18:10
Статья в формате PDF 134 KB...
12 11 2019 3:49:44
Статья в формате PDF 116 KB...
11 11 2019 23:25:21
Статья в формате PDF 116 KB...
08 11 2019 19:14:25
Статья в формате PDF 128 KB...
06 11 2019 16:38:45
Статья в формате PDF 683 KB...
05 11 2019 13:49:45
Статья в формате PDF 277 KB...
03 11 2019 13:45:54
Статья в формате PDF 109 KB...
02 11 2019 5:44:20
Статья в формате PDF 115 KB...
30 10 2019 15:57:34
Статья в формате PDF 115 KB...
29 10 2019 18:20:27
Статья в формате PDF 308 KB...
28 10 2019 16:37:53
Статья в формате PDF 113 KB...
27 10 2019 10:32:10
Статья в формате PDF 307 KB...
26 10 2019 5:21:29
Статья в формате PDF 115 KB...
25 10 2019 9:54:19
Статья в формате PDF 278 KB...
24 10 2019 1:57:30
Статья в формате PDF 106 KB...
23 10 2019 18:21:34
Статья в формате PDF 302 KB...
22 10 2019 5:39:34
Статья в формате PDF 139 KB...
21 10 2019 19:59:53
Разработан новый морфометрический показатель площади контакта эпителия и стромы. Показатель использовался автором при многолетних исследованиях морфофункционального состояния щитовидной железы у женщин и в эксперименте. ...
20 10 2019 15:38:20
Статья в формате PDF 101 KB...
19 10 2019 20:50:32
Статья в формате PDF 116 KB...
17 10 2019 18:40:54
Статья в формате PDF 123 KB...
16 10 2019 5:58:39
Статья в формате PDF 123 KB...
15 10 2019 21:14:33
Статья в формате PDF 227 KB...
14 10 2019 2:35:29
Статья в формате PDF 251 KB...
13 10 2019 23:19:21
Статья в формате PDF 99 KB...
11 10 2019 7:49:51
Статья в формате PDF 114 KB...
10 10 2019 4:49:22
Статья в формате PDF 118 KB...
09 10 2019 4:31:23
Статья в формате PDF 129 KB...
07 10 2019 14:36:16
Статья в формате PDF 126 KB...
06 10 2019 12:45:18
Статья в формате PDF 109 KB...
05 10 2019 10:24:50
Статья в формате PDF 172 KB...
04 10 2019 10:25:47
Статья в формате PDF 122 KB...
03 10 2019 5:58:56
Статья в формате PDF 279 KB...
01 10 2019 18:11:59
Статья в формате PDF 113 KB...
30 09 2019 2:52:48
Статья в формате PDF 263 KB...
27 09 2019 20:21:57
Статья в формате PDF 103 KB...
26 09 2019 22:47:25
Статья в формате PDF 115 KB...
25 09 2019 4:43:17
Статья в формате PDF 96 KB...
24 09 2019 9:29:28
Статья в формате PDF 113 KB...
22 09 2019 6:20:52
Статья в формате PDF 505 KB...
21 09 2019 0:46:49
Приведены аномальные структуры геохимических полей ( А С Г П) по вторичным ореолам рассеяния месторождений и проявлений эптермального золото-серебряного оруденения. Оруденение в регионах связано с венд-раннекембийскими и среднедевонскими вулканогенными образованиями. Показаны различные наборы аномальных значений химических элементов в зонах ядерного концентрирования, транзита элементов и фронтальных зонах концентрирования. Оценен условный потенциал ионизации в зональных конструкциях А С Г П, показывающих кислотно – основной потенциал среды минералообразования. Проведен факторный анализ для всех зон А С Г П c показом эллипсоидов изменчивости и факторных нагрузок. ...
19 09 2019 4:10:12
Статья в формате PDF 117 KB...
18 09 2019 8:47:51
С экологических позиций излагается представление о человеке как метасистеме, состоящей из макроскопического (тело) и микроскопического (микробиота) компонентов. Последний определяется как биоценоз микроорганизмов — бактерий, простейших, микроскопических грибов и вирусов, встречающийся у здоровых людей. Приводятся некоторые количественные характеристики микробиоты человека: общее число микроорганизмов, суммарная биомасса, процентное содержание облигатной, факультативной и транзиторной составляющих, время, за которое происходит смена генерации микроорганизмов. Рассматриваются главные системоообразующие факторы, обеспечивающие целостность микробиоты: структурный, метаболический, генетический и информационный. Анализируются взаимоотношения микробиоты и макроорганизма в нормальных физиологических условиях и при патологии. Обсуждаются механизмы развития дисбиозов и патогенетически обоснованные подходы к их коррекции. ...
15 09 2019 2:29:31
Статья в формате PDF 115 KB...
14 09 2019 16:41:25
Статья в формате PDF 113 KB...
13 09 2019 16:50:43
Статья в формате PDF 116 KB...
12 09 2019 14:41:58
Статья в формате PDF 121 KB...
09 09 2019 15:55:12
Работа подъема тела в однородном поле силы тяжести всегда больше потенциальной энергии . Для минимизации работы силой тяги, равной , необходимо отключать силу тяги на некоторой высоте . Дальнейшее движение вверх до высоты происходит по инерции. Только в случае работа подъема будет стремиться к минимальному значению, равному . ...
08 09 2019 19:23:35
Статья в формате PDF 124 KB...
07 09 2019 8:37:15
В работе приводятся сведения относительно возможности применения тестовых заданий и биологических задач для исследования личностных особенностей учащихся и выявления одаренных детей. Показано, что использование этого подхода может способствовать повышению эффективности выявления школьников с повышенным уровнем интеллекта. ...
06 09 2019 3:44:10
Статья в формате PDF 131 KB...
05 09 2019 11:33:45
Статья в формате PDF 164 KB...
04 09 2019 0:15:38
В опытах с 19 полосками миометрия, полученных от 5 женщин в конце доношенной беременности при плановом кесаревом сечении, установлено, что озонированный ( ≈0,50 мкг/мл) раствор Кребса ингибирует спонтанную сократительную активность миометрия и существенно уменьшает стимулирующий эффект адреналина, т.е. снижает его α-адренореактивность. Это объясняет эффективность озонотерапии при угрозе прерывания беременности и дискоординированной родовой деятельности. ...
03 09 2019 15:12:14
Статья в формате PDF 452 KB...
02 09 2019 6:12:58
Статья в формате PDF 119 KB...
01 09 2019 11:41:17
Статья в формате PDF 129 KB...
31 08 2019 2:22:19
Статья в формате PDF 114 KB...
29 08 2019 20:47:53
В исследовании изучена возможность оптимизации терапии больных урогенитальным хламидиозом, на основе внедрения новой методики цитокининдуцированного определения чувствительности к лекарственным средствам. Под наблюдением находилось 240 больных урогенитальным хламидиозом обоего пола, в возрасте от 18 до 65 лет. В результате применения цитокининдуцированной методики определения чувствительности к лекарственным средствам, удалось значительным образом повысить эффективность терапии больных хламидиозом. ...
28 08 2019 15:28:51
Статья в формате PDF 121 KB...
27 08 2019 12:18:43
Статья в формате PDF 153 KB...
26 08 2019 1:50:38
Статья в формате PDF 93 KB...
25 08 2019 22:52:40
Статья в формате PDF 120 KB...
24 08 2019 5:44:40
Статья в формате PDF 256 KB...
23 08 2019 11:30:41
Статья в формате PDF 106 KB...
22 08 2019 18:40:54
Статья в формате PDF 161 KB...
21 08 2019 17:24:34
Статья в формате PDF 85 KB...
20 08 2019 16:43:52
Статья в формате PDF 306 KB...
19 08 2019 5:26:53
Статья в формате PDF 226 KB...
18 08 2019 16:28:19
Статья в формате PDF 316 KB...
16 08 2019 16:46:22
Статья в формате PDF 104 KB...
15 08 2019 0:36:48
Статья в формате PDF 255 KB...
14 08 2019 20:48:25
Статья в формате PDF 111 KB...
13 08 2019 4:48:23
Статья в формате PDF 97 KB...
12 08 2019 20:10:38
Статья в формате PDF 142 KB...
11 08 2019 8:13:28
Статья в формате PDF 118 KB...
10 08 2019 1:24:32
Статья в формате PDF 102 KB...
09 08 2019 5:10:22
Статья в формате PDF 315 KB...
08 08 2019 16:59:12
Статья в формате PDF 130 KB...
07 08 2019 5:56:40
Статья в формате PDF 107 KB...
04 08 2019 2:11:14
Статья в формате PDF 141 KB...
02 08 2019 2:58:21
Статья в формате PDF 303 KB...
01 08 2019 10:42:51
Статья в формате PDF 98 KB...
31 07 2019 13:31:15
Статья в формате PDF 251 KB...
30 07 2019 21:42:37
Статья в формате PDF 188 KB...
29 07 2019 1:23:53
Статья в формате PDF 151 KB...
28 07 2019 0:48:31
Статья в формате PDF 121 KB...
27 07 2019 15:16:12
Статья в формате PDF 203 KB...
26 07 2019 3:43:39
Статья в формате PDF 137 KB...
25 07 2019 9:12:36
Статья в формате PDF 91 KB...
24 07 2019 12:34:32
Статья в формате PDF 127 KB...
23 07 2019 13:55:42
Статья в формате PDF 195 KB...
22 07 2019 0:54:20
Статья в формате PDF 140 KB...
20 07 2019 20:19:39
Разработан пакет графических алгоритмических моделей отбраковочных испытаний радиоприемных устройств, изготавливаемых и выпускаемых предприятием, как первый шаг к последующей автоматизации. Показано преимущество разработанных моделей по сравнению с действующей текстовой инструкцией по проведению испытаний. ...
19 07 2019 6:56:39
Статья в формате PDF 256 KB...
17 07 2019 14:29:16
Статья в формате PDF 254 KB...
16 07 2019 2:34:56
Статья в формате PDF 153 KB...
15 07 2019 3:30:49
Еще:
Обзоры -1 :: Обзоры -2 :: Обзоры -3 :: Обзоры -4 :: Обзоры -5 :: Обзоры -6 :: Обзоры -7 :: Обзоры -8 :: Обзоры -9 :: Обзоры -10 :: Обзоры -11 ::
Последовательность подготовки научной работы может быть такой: