СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ МЕТОДОВ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ ЛИСТЕРИОЗА БЕРЕМЕННЫХ И НОВОРОЖДЕННЫХ
Медицинские проблемы листериоза определяются: возрастающей ролью листерий в перинатальной и неонатальной патологии, способностью возбудителя вызывать тяжелую, часто смертельную инфекцию при снижении уровня клеточного иммунитета восприимчивой популяции. Снижение уровня клеточного иммунитета во время беременности, особенно в поздние сроки, обусловливает повышение восприимчивости к листериозной инфекции у данной группы риска, вызывая выкидыши, мертворождение, пороки развития плода и т.д. В целом беременные заболевают листериозом в 20 раз чаще, чем здоровые люди, и около 35% всего зарегистрированного листериоза наблюдалось во время беременности. Так, в США листериоз у беременных женщин составляет около 27% от общего числа заболевших этой инфекцией и около 60% случаев приходится на возраст от 10 до 40 лет. Смертность при листериозе беременных женщин и новорожденных достигает 30-50% [Тартаковский И.С., 2002; Омарова С.М., 2007].
Диагностирование листериоза у беременных и новорожденных основывается на данных акушерского анамнеза (выкидыши, недонашивание, мертворождение) и результатах лабораторно-клинического обследования матери и ребенка.
В настоящее время в связи с развитием молекулярно-биологических методов диагностики (ПЦР, ЛЦР и др.) становится целесообразным обследование беременных женщин наряду с известными инфекциями и на листериоз, особенно для женщин с отягощенным акушерским анамнезом.
Одним из важных этапов совершенствования эпидемиологического мониторинга и диагностики листериоза в России является разработка новых и усовершенствование существующих отечественных иммунобиологических препаратов для выделения и идентификации листерий. Это позволит в полной мере реализовать современные схемы индикации L.monocytogenes, в соответствии с международными требованиями и стандартами [Тартаковский И.С., 2002; Омарова С.М., 2007].
В России число выявленных больных листериозом невелико (до 100 случаев ежегодно), что, вероятно, связано с отсутствием надежных методов бактериологической диагностики и эффективной системы эпидемиологического мониторинга инфекции.
Для изучения перинатальных факторов риска инфицирования листериями матери и плода, а также с целью установления причин патологии и смертности среди детей в перинатальном и младенческом возрасте было проведено обследование беременных женщин и новорожденных. Изучение клинического материала от беременных с подозрением на листериоз проводили с использованием комплекса лабораторных методов - бактериологического, серологического и молекулярно-генетического, для повышения процента выявляемости возбудителя.
С помощью бактериологического метода, РПГА, ИФА и ПЦР обследовано 352 беременные женщины, роженицы и родильницы, находившиеся на учете в кабинете бесплодия женской консультации №1 и 132 новорожденных Перинатального центра г. Махачкала.
Во всех случаях клинического проявления инфекции при посеве исследуемого материала на разработанную селективную средудля выделения листерий САЛ-1 через 18±2 ч инкубации при температуре 37±1°С вырастали типичные серовато-зеленые колонии с темным центром в S-форме, d=1,7±0,2 мм. Колонии были окружены характерным коричнево-черным ореолом.
Из изученного клинического материала выделено и идентифицировано до вида 19 культур L.monocytogenes (17,2%). Листерии выделялись достоверно чаще (р=0,001) со слизистой оболочки влагалища (67,4%), чем из цервикального канала (23,3%); реже из зева (1,3%). Изолированные штаммы L.monocytogenes были типированы в реакции агглютинации (РА) и отнесены к сероварам: 4в, 1/2а и 1/2с. Принадлежность 19 изолятов к виду L.monocytogenes подтверждена молекулярно-биологическим методом в полимеразной цепной реакции (ПЦР) с видоспецифическими праймерами.
Колонии листерий, выросшие на разработанной селективной среде, изучены по биохимическим тестам с помощью микротестсистемы МТС-12Л. Все выделенные культуры L. monocytogenes ферментировали с образованием кислоты без газа глюкозу, маннозу, рамнозу, эскулин, не ферментировали маннит, ксилозу, лактозу, арабинозу, что соответствует биохимическим особенностям листерий.
Изучение факторов патогенности изолированных из клинического материала листерий осуществляли путем определения в - гемолитической и лецитиназной активности. Сравнительное изучение в - гемолитической активности, являющейся показателем вирулентности, проводили с использованием в качестве контроля тест-штаммов листерий обладающих гемолитической активностью. В результате установлено, что выделенные культуры обладали характерной для патогенного вида L.monocytogenes в - гемолитической активностью.
Как известно, сочетание признаков положительной гемолитической активности и ферментации рамнозы при отсутствии сбраживания ксилозы указывают на патогенность культур листерий, т.е. на возможность их участия в патологическом процессе.
Наряду с исследованием клинического материала от беременных изучены лабораторные образцы от 132 новорожденных ребенка, которые представляли группу риска по развитию внутриутробной инфекции (ВУИ). Ребенка рассматривали как инфицированного, если маркеры изученных инфекций были обнаружены, по крайней мере, в одном из полученных от него образцов клинического материала. Анализ полученных данных показал, что ДНК изученных инфекций выявлена во всех группах, в том числе у детей без признаков ВУИ. Так, наиболее часто ДНК ЦМВ выявлялась в группе обследованных в возрасте 1-2 месяцев, даже значительно чаще, чем у новорожденных с ВУИ, обследованных на первой неделе жизни, а ДНК листериозной инфекции чаще выявлялись в группе новорожденных обследованных на первой неделе жизни, чем в группе новорожденных в возрасте 1-2 месяцев.
Бактериологическим методом кроме листерий была выявлена сопутствующая микрофлора. Из представителей бактериальной флоры чаще выделяли энтеробактерии - 73,5%; грибы рода Candida в 6,5%; бактерий других родов в 12,8%. Кроме того клинические образцы ДНК, выделенные из соскобов эпителиальных клеток цервикального канала и влагалища были проанализированы ПЦР методом на наличие специфических фрагментов - U.urealyticum, M.genitalium, C.trachomatis, T.vaginalis, HCMV, HSV (1 и 2 типов), HPV (16 и 18 типов), при помощи ПЦР. В 31% случаев выявлялись хламидии, трихомонады - 25%, папиллома вирус человека - 11%, гонококки - 11%, уреаплазмы - 8%, вирус простого герпеса - 5%.
Результаты исследования клинического материала показали, что наряду с листериями у обследованных с акушерской патологией выявляли условно-патогенные энтеробактерии и специфические инфекции, обладающие факторами, определяющими возможность их участия в патогенезе заболевания.
Штаммы L.monocytogenes, выделенные от беременных женщин и новорожденных (всего 26) были протестированы (in vitro) на чувствительность к антибактериальным препаратам. Наиболее высокую чувствительность выделенные культуры проявляли к антибиотикам цефалоспоринового ряда четвертого и третьего поколения (так 81,4% штаммов показали чувствительность к цефтриаксону, 79,1% - к цефаклору, 74,3% - к цефазолину и 73,8% - к цефамезину, 68,1%-к цефалотину). На втором месте по эффективности оказались фторхинолоны (85,3% штаммов были чувствительны к ципрофлоксацину). На третьем месте по эффективности оказались нитрофураны (63,6%, выделенных штаммов имели к ним чувствительность). Листерии, выделенные в ходе настоящего исследования, были высокочувствительны к линезолиду (МИК составляла 60,0 мкг/мл) и рифампицину (62,5% штаммов); 22,8% штаммов показали чувствительность к гентамицину, 27,9% - к ампициллину. К препаратам других групп, чувствительность проявлялась реже (р <0,05).
В итоге, ни один препарат, не показал 100% эффективности (in vitro) к протестированным штаммам листериям, из чего следует, что необходимо проводить комплексную антибиотикотерапию листериоза - несколькими препаратами. Причем выбор препаратов должен осуществляться из вышеперечисленных групп и, только по результатам антибиотикограммы. У 1,4% клинических штаммов L.monocytogenes наблюдалась резистентность к антибиотикам.
Как известно, важным аспектом проведенного этиотропного лечения является контроль критерия излеченности - это улучшение клиники листериоза у беременных; исчезновение характерных признаков, в частности угрозы прерывания и признаков воспаления - боли, выделения; исчезновение листерий при микроскопическом и бактериологическом исследовании мазков; исход родов и т.д.
Результаты бактериологических исследований с применением новых отечественных селективных питательных сред, обладающих высокой чувствительностью и специфичностью в отношении роста культур рода Listeria, подтвержденных методами ПЦР диагностики, РНИФ и РПГА определяют целесообразность проведения комплексного обследования клинического материала тремя и более методами, которое повышает диагностическую эффективность микробиологической диагностики листериоза среди беременных и новорожденных.
Отзывы (через Facebook):
Оставить отзыв с помощью аккаунта FaceBook:
Статья в формате PDF 183 KB...
02 07 2020 5:34:24
Статья в формате PDF 132 KB...
01 07 2020 9:37:13
Статья посвящена вопросам изучения антимикробных свойств природных биологически активных соединений – флавоноидов и фенолкарбоновых кислот, извлекаемых методом вихревой турбоэкстракции из сырья растений рода Veronica L. (сем. Scrophulariaceae Juss.) Предуралья. На основании проведенного исследования авторы делают вывод о возможности применения растительного сырья Veronica L. в медицинской практике. ...
30 06 2020 10:21:18
Статья в формате PDF 124 KB...
29 06 2020 17:10:58
Статья в формате PDF 117 KB...
28 06 2020 7:52:15
Статья в формате PDF 113 KB...
27 06 2020 20:33:16
Впервые было изучено интерлейкина – 8 – 251 Т А среди женщин Азербайджана больными эндометриозом. 50 практически здоровых и 70 женщин больных эндомертиозом находились под нашем наблюдением. Исследование показали что, генетический полиморизм интерлейкина – 8 А/ Т 251 играет роль в потогенезе эндометриоза. ...
26 06 2020 20:44:48
Статья в формате PDF 111 KB...
24 06 2020 1:10:10
Статья в формате PDF 119 KB...
23 06 2020 9:24:31
Статья в формате PDF 244 KB...
22 06 2020 22:34:15
Статья в формате PDF 289 KB...
21 06 2020 6:40:24
Статья в формате PDF 298 KB...
20 06 2020 8:48:27
Статья в формате PDF 109 KB...
19 06 2020 18:23:46
Статья в формате PDF 111 KB...
17 06 2020 19:55:43
Статья в формате PDF 112 KB...
16 06 2020 8:45:14
Статья в формате PDF 103 KB...
15 06 2020 23:31:12
Статья в формате PDF 114 KB...
14 06 2020 23:30:15
Статья в формате PDF 200 KB...
13 06 2020 14:58:57
Статья в формате PDF 106 KB...
11 06 2020 3:34:15
Статья в формате PDF 137 KB...
10 06 2020 13:37:19
Статья в формате PDF 109 KB...
08 06 2020 21:37:29
Статья в формате PDF 106 KB...
07 06 2020 9:45:24
Статья в формате PDF 255 KB...
06 06 2020 9:45:16
Статья в формате PDF 111 KB...
05 06 2020 7:42:35
Статья в формате PDF 295 KB...
04 06 2020 23:44:57
Статья в формате PDF 127 KB...
03 06 2020 16:17:21
Статья в формате PDF 105 KB...
02 06 2020 5:17:36
Статья в формате PDF 128 KB...
01 06 2020 20:59:26
Статья в формате PDF 117 KB...
31 05 2020 16:38:53
Статья в формате PDF 283 KB...
30 05 2020 3:53:49
Статья в формате PDF 120 KB...
29 05 2020 17:52:34
Статья в формате PDF 119 KB...
28 05 2020 0:41:21
Статья в формате PDF 121 KB...
27 05 2020 16:40:19
Статья в формате PDF 121 KB...
26 05 2020 7:18:30
Статья в формате PDF 119 KB...
25 05 2020 6:16:25
Статья в формате PDF 101 KB...
24 05 2020 15:19:26
Статья в формате PDF 130 KB...
23 05 2020 17:10:31
Статья в формате PDF 124 KB...
21 05 2020 4:58:43
Статья в формате PDF 346 KB...
20 05 2020 6:21:28
Статья в формате PDF 106 KB...
19 05 2020 9:12:49
Статья в формате PDF 114 KB...
18 05 2020 6:43:44
Статья в формате PDF 151 KB...
17 05 2020 7:46:59
Статья в формате PDF 117 KB...
16 05 2020 7:50:56
Статья в формате PDF 100 KB...
15 05 2020 20:31:48
Статья в формате PDF 495 KB...
14 05 2020 10:19:50
Статья в формате PDF 147 KB...
12 05 2020 18:53:41
Статья в формате PDF 119 KB...
11 05 2020 14:21:35
Статья в формате PDF 268 KB...
10 05 2020 2:29:31
Статья в формате PDF 132 KB...
09 05 2020 11:29:38
Статья в формате PDF 130 KB...
07 05 2020 21:59:43
Статья в формате PDF 255 KB...
06 05 2020 0:14:41
Статья в формате PDF 181 KB...
05 05 2020 21:28:55
Статья в формате PDF 303 KB...
04 05 2020 3:19:10
Статья в формате PDF 98 KB...
02 05 2020 10:10:23
Статья в формате PDF 361 KB...
01 05 2020 5:45:36
Статья в формате PDF 107 KB...
30 04 2020 5:48:20
Статья в формате PDF 173 KB...
29 04 2020 2:32:48
Статья в формате PDF 114 KB...
26 04 2020 18:40:36
По результатам измерений ширины годичных слоев на рабочей части керна и определения радиального роста дерева, и последующей идентификации по ним статистической закономерности, выполняют прогнозирование на ретроспективу на число лет с начала рабочей зоны керна до момента начала жизни измеряемого учетного дерева. ...
25 04 2020 7:31:30
Статья в формате PDF 116 KB...
24 04 2020 22:20:50
Статья в формате PDF 127 KB...
23 04 2020 1:48:15
Статья в формате PDF 108 KB...
22 04 2020 19:35:54
Статья в формате PDF 87 KB...
21 04 2020 0:49:53
Статья в формате PDF 107 KB...
20 04 2020 14:51:38
Выделены навыки социальной коммуникации, необходимые для успешного освоения химических дисциплин. Предложен один из путей снятия напряженности в процессе общения преподавателя и студента - виртуальный письменный диалог, реализованный в виде учебного пособия. Используемые в пособии методические приемы позволяют наиболее полно сформировать необходимый инструментарий познания: (логические операции + социальная коммуникация) → понимание → знание. ...
19 04 2020 23:51:54
Статья в формате PDF 105 KB...
18 04 2020 9:57:36
Статья в формате PDF 97 KB...
17 04 2020 11:31:55
Статья в формате PDF 259 KB...
16 04 2020 21:15:34
Статья в формате PDF 98 KB...
14 04 2020 11:21:32
Статья в формате PDF 124 KB...
13 04 2020 21:36:56
Статья в формате PDF 118 KB...
12 04 2020 1:23:21
Статья в формате PDF 127 KB...
11 04 2020 23:53:48
Статья в формате PDF 115 KB...
10 04 2020 11:53:42
Статья в формате PDF 245 KB...
09 04 2020 6:56:54
Понятие время является важнейшим понятием, как физики, так и философии. Актуальность этой проблемы обусловлена тем, что до сих пор, несмотря на широкий круг исследований, не сложилось твердо закрепленного представления о времени. В статье делается попытка раскрыть сущность понятия времени и связать меру времени с движением. За меру времени механического движения предлагается выбрать путь, пройденный, например, концом стрелки часов, участвующей не только в собственном движении относительно циферблата, как это принято, но и в сложном движении, включающем движение часов как целое относительно внешнего наблюдателя. Синхронизация хода часов производится по периодам их движений в соответствие с принятым эталоном времени. Рассматривается случай, когда часы движутся относительно внешнего наблюдателя с постоянной скоростью. Такой подход к проблеме времени позволяет понять его непрерывность и бесконечность. ...
08 04 2020 5:45:33
Статья в формате PDF 248 KB...
05 04 2020 19:18:11
Статья в формате PDF 144 KB...
04 04 2020 17:25:25
Статья в формате PDF 319 KB...
03 04 2020 11:15:45
Статья в формате PDF 84 KB...
02 04 2020 18:24:48
Статья в формате PDF 337 KB...
01 04 2020 17:56:34
Статья в формате PDF 99 KB...
31 03 2020 1:58:51
Статья в формате PDF 250 KB...
30 03 2020 21:12:13
Статья в формате PDF 105 KB...
29 03 2020 19:38:54
Статья в формате PDF 162 KB...
28 03 2020 22:50:26
Статья в формате PDF 134 KB...
27 03 2020 6:59:49
Статья в формате PDF 284 KB...
26 03 2020 5:22:30
Статья в формате PDF 106 KB...
25 03 2020 10:22:19
Статья в формате PDF 109 KB...
22 03 2020 7:17:41
Статья в формате PDF 161 KB...
21 03 2020 14:51:19
Статья в формате PDF 102 KB...
20 03 2020 10:40:31
Статья в формате PDF 129 KB...
18 03 2020 13:16:11
Статья в формате PDF 170 KB...
17 03 2020 21:39:57
Статья в формате PDF 111 KB...
16 03 2020 7:27:38
Статья в формате PDF 115 KB...
15 03 2020 10:11:54
Статья в формате PDF 138 KB...
14 03 2020 7:11:55
В работе сформулированы принципы валеологического мировоззрения как образца устремлений, выполняющих ориентационную, нормирующую, прогностическую функции в отношении здоровья и здорового образа жизни. ...
13 03 2020 14:26:35
Проведен анализ эффективности различных типов фитнес-программ в коррекции избыточной массы тела женщин юношеского и зрелого возраста. Применяемые физические нагрузки отличались характером нагрузки и наличию/отсутствию компонента коррекции питания. Исследовали антропометрические показатели, И М Т, определяли содержание жировой массы в организме методом калипометрии в динамике 6-месячного тренировочного цикла. Проводили промежуточные исследования: в середине, через 3 месяца от начала тренировочного цикла. В исследовании приняли участие 93 практически здоровые женщины с избыточной массой тела, не имеющие эндокринных заболеваний и противопоказаний к занятиям физической культурой. Выделены группы в зависимости от типа программы (I, II), а также подгруппы (Ia, IIa) в зависимости от возраста: 18–21 год (I и II, n = 17 и n = 17, соответственно) и 36–45 лет (Ia, IIa, n = 30 и n = 29, соответственно). Показана динамика и статистическая значимость различий в группах, проведен сравнительный анализ между группами. Выявлена более высокая физиологическая эффективность программы I, базирующейся на смешанном характере тренировки, многовариантной схеме упражнений с мониторированием и коррекцией характера питания. ...
12 03 2020 0:48:52
Статья в формате PDF 101 KB...
11 03 2020 15:27:23
Статья в формате PDF 554 KB...
10 03 2020 19:14:54
Статья в формате PDF 128 KB...
09 03 2020 4:44:40
Статья в формате PDF 138 KB...
08 03 2020 4:48:12
Статья в формате PDF 106 KB...
07 03 2020 2:48:37
Статья посвящена авторской методологии прогнозирования экономического потенциала региона на примере Краснодарского края. В ходе научных исследований был разработан оригинальный математический аппарат, позволяющий оценить основные экономические показатели региона, который применяется для социально-экономического прогноза региона на текущий и перспективный периоды. Описательная часть содержит основные подходы и этапы эффективного экономического прогнозирования региона. ...
06 03 2020 3:24:27
Статья в формате PDF 140 KB...
05 03 2020 2:58:56
Статья в формате PDF 170 KB...
04 03 2020 16:15:44
Статья в формате PDF 245 KB...
03 03 2020 21:47:43
Статья в формате PDF 89 KB...
02 03 2020 15:40:18
Статья в формате PDF 104 KB...
01 03 2020 18:31:14
Статья в формате PDF 235 KB...
29 02 2020 15:57:59
Применен метод дисперсионного анализа для изучения силы влияния различных комплексных природных факторов на изменчивость длины шишки ели сибирской, произрастающей в Уральской лесорастительной провинции. Показано, что наибольшее влияние на изменчивость длины шишки в этом районе имеют индивидуальные особенности деревьев, долгота местности и высота над уровнем моря. ...
28 02 2020 23:51:31
Статья в формате PDF 115 KB...
27 02 2020 16:13:23
Статья в формате PDF 138 KB...
26 02 2020 2:23:16
Статья в формате PDF 122 KB...
25 02 2020 14:25:38
Статья в формате PDF 149 KB...
24 02 2020 2:37:12
Статья в формате PDF 119 KB...
22 02 2020 22:21:10
Статья в формате PDF 101 KB...
21 02 2020 10:15:46
Статья в формате PDF 117 KB...
20 02 2020 15:24:20
Статья в формате PDF 217 KB...
19 02 2020 13:12:57
Статья в формате PDF 109 KB...
17 02 2020 23:59:44
Статья в формате PDF 89 KB...
16 02 2020 16:55:31
Статья в формате PDF 172 KB...
14 02 2020 1:53:25
Статья в формате PDF 109 KB...
13 02 2020 7:10:43
Статья в формате PDF 104 KB...
12 02 2020 12:23:18
В опытах на беспородных белых крысах с экспериментальной ишемией миокарда в динамике наблюдений отмечено снижение уровня А Т Ф и креатинфосфата в гомогенатах миокарда на фоне подавления активности сукцинатдегидрогеназы, лактатдегидрогеназы, аспартатаминотрансферазы. Достигнуты положительные метаболические эффекты при введении ишемизированным животным неотона – донатора макроэргических связей и оказывающего активирующий эффект на ферменты гликолиза и цикла трикарбоновых кислот в динамике патологии. ...
11 02 2020 5:20:57
Статья в формате PDF 103 KB...
10 02 2020 12:36:39
Статья в формате PDF 111 KB...
09 02 2020 3:50:45
Статья в формате PDF 192 KB...
08 02 2020 7:22:29
Статья в формате PDF 170 KB...
07 02 2020 4:59:29
Статья в формате PDF 376 KB...
06 02 2020 19:55:15
Статья в формате PDF 273 KB...
04 02 2020 8:11:55
Еще:
Обзоры -1 :: Обзоры -2 :: Обзоры -3 :: Обзоры -4 :: Обзоры -5 :: Обзоры -6 :: Обзоры -7 :: Обзоры -8 :: Обзоры -9 :: Обзоры -10 :: Обзоры -11 ::
Последовательность подготовки научной работы может быть такой: