СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ МЕТОДОВ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ ЛИСТЕРИОЗА БЕРЕМЕННЫХ И НОВОРОЖДЕННЫХ
Источник:
Медицинские проблемы листериоза определяются: возрастающей ролью листерий в перинатальной и неонатальной патологии, способностью возбудителя вызывать тяжелую, часто смертельную инфекцию при снижении уровня клеточного иммунитета восприимчивой популяции. Снижение уровня клеточного иммунитета во время беременности, особенно в поздние сроки, обусловливает повышение восприимчивости к листериозной инфекции у данной группы риска, вызывая выкидыши, мертворождение, пороки развития плода и т.д. В целом беременные заболевают листериозом в 20 раз чаще, чем здоровые люди, и около 35% всего зарегистрированного листериоза наблюдалось во время беременности. Так, в США листериоз у беременных женщин составляет около 27% от общего числа заболевших этой инфекцией и около 60% случаев приходится на возраст от 10 до 40 лет. Смертность при листериозе беременных женщин и новорожденных достигает 30-50% [Тартаковский И.С., 2002; Омарова С.М., 2007].
Диагностирование листериоза у беременных и новорожденных основывается на данных акушерского анамнеза (выкидыши, недонашивание, мертворождение) и результатах лабораторно-клинического обследования матери и ребенка.
В настоящее время в связи с развитием молекулярно-биологических методов диагностики (ПЦР, ЛЦР и др.) становится целесообразным обследование беременных женщин наряду с известными инфекциями и на листериоз, особенно для женщин с отягощенным акушерским анамнезом.
Одним из важных этапов совершенствования эпидемиологического мониторинга и диагностики листериоза в России является разработка новых и усовершенствование существующих отечественных иммунобиологических препаратов для выделения и идентификации листерий. Это позволит в полной мере реализовать современные схемы индикации L.monocytogenes, в соответствии с международными требованиями и стандартами [Тартаковский И.С., 2002; Омарова С.М., 2007].
В России число выявленных больных листериозом невелико (до 100 случаев ежегодно), что, вероятно, связано с отсутствием надежных методов бактериологической диагностики и эффективной системы эпидемиологического мониторинга инфекции.
Для изучения перинатальных факторов риска инфицирования листериями матери и плода, а также с целью установления причин патологии и смертности среди детей в перинатальном и младенческом возрасте было проведено обследование беременных женщин и новорожденных. Изучение клинического материала от беременных с подозрением на листериоз проводили с использованием комплекса лабораторных методов - бактериологического, серологического и молекулярно-генетического, для повышения процента выявляемости возбудителя.
С помощью бактериологического метода, РПГА, ИФА и ПЦР обследовано 352 беременные женщины, роженицы и родильницы, находившиеся на учете в кабинете бесплодия женской консультации №1 и 132 новорожденных Перинатального центра г. Махачкала.
Во всех случаях клинического проявления инфекции при посеве исследуемого материала на разработанную селективную средудля выделения листерий САЛ-1 через 18±2 ч инкубации при температуре 37±1°С вырастали типичные серовато-зеленые колонии с темным центром в S-форме, d=1,7±0,2 мм. Колонии были окружены характерным коричнево-черным ореолом.
Из изученного клинического материала выделено и идентифицировано до вида 19 культур L.monocytogenes (17,2%). Листерии выделялись достоверно чаще (р=0,001) со слизистой оболочки влагалища (67,4%), чем из цервикального канала (23,3%); реже из зева (1,3%). Изолированные штаммы L.monocytogenes были типированы в реакции агглютинации (РА) и отнесены к сероварам: 4в, 1/2а и 1/2с. Принадлежность 19 изолятов к виду L.monocytogenes подтверждена молекулярно-биологическим методом в полимеразной цепной реакции (ПЦР) с видоспецифическими праймерами.
Колонии листерий, выросшие на разработанной селективной среде, изучены по биохимическим тестам с помощью микротестсистемы МТС-12Л. Все выделенные культуры L. monocytogenes ферментировали с образованием кислоты без газа глюкозу, маннозу, рамнозу, эскулин, не ферментировали маннит, ксилозу, лактозу, арабинозу, что соответствует биохимическим особенностям листерий.
Изучение факторов патогенности изолированных из клинического материала листерий осуществляли путем определения в - гемолитической и лецитиназной активности. Сравнительное изучение в - гемолитической активности, являющейся показателем вирулентности, проводили с использованием в качестве контроля тест-штаммов листерий обладающих гемолитической активностью. В результате установлено, что выделенные культуры обладали характерной для патогенного вида L.monocytogenes в - гемолитической активностью.
Как известно, сочетание признаков положительной гемолитической активности и ферментации рамнозы при отсутствии сбраживания ксилозы указывают на патогенность культур листерий, т.е. на возможность их участия в патологическом процессе.
Наряду с исследованием клинического материала от беременных изучены лабораторные образцы от 132 новорожденных ребенка, которые представляли группу риска по развитию внутриутробной инфекции (ВУИ). Ребенка рассматривали как инфицированного, если маркеры изученных инфекций были обнаружены, по крайней мере, в одном из полученных от него образцов клинического материала. Анализ полученных данных показал, что ДНК изученных инфекций выявлена во всех группах, в том числе у детей без признаков ВУИ. Так, наиболее часто ДНК ЦМВ выявлялась в группе обследованных в возрасте 1-2 месяцев, даже значительно чаще, чем у новорожденных с ВУИ, обследованных на первой неделе жизни, а ДНК листериозной инфекции чаще выявлялись в группе новорожденных обследованных на первой неделе жизни, чем в группе новорожденных в возрасте 1-2 месяцев.
Бактериологическим методом кроме листерий была выявлена сопутствующая микрофлора. Из представителей бактериальной флоры чаще выделяли энтеробактерии - 73,5%; грибы рода Candida в 6,5%; бактерий других родов в 12,8%. Кроме того клинические образцы ДНК, выделенные из соскобов эпителиальных клеток цервикального канала и влагалища были проанализированы ПЦР методом на наличие специфических фрагментов - U.urealyticum, M.genitalium, C.trachomatis, T.vaginalis, HCMV, HSV (1 и 2 типов), HPV (16 и 18 типов), при помощи ПЦР. В 31% случаев выявлялись хламидии, трихомонады - 25%, папиллома вирус человека - 11%, гонококки - 11%, уреаплазмы - 8%, вирус простого герпеса - 5%.
Результаты исследования клинического материала показали, что наряду с листериями у обследованных с акушерской патологией выявляли условно-патогенные энтеробактерии и специфические инфекции, обладающие факторами, определяющими возможность их участия в патогенезе заболевания.
Штаммы L.monocytogenes, выделенные от беременных женщин и новорожденных (всего 26) были протестированы (in vitro) на чувствительность к антибактериальным препаратам. Наиболее высокую чувствительность выделенные культуры проявляли к антибиотикам цефалоспоринового ряда четвертого и третьего поколения (так 81,4% штаммов показали чувствительность к цефтриаксону, 79,1% - к цефаклору, 74,3% - к цефазолину и 73,8% - к цефамезину, 68,1%-к цефалотину). На втором месте по эффективности оказались фторхинолоны (85,3% штаммов были чувствительны к ципрофлоксацину). На третьем месте по эффективности оказались нитрофураны (63,6%, выделенных штаммов имели к ним чувствительность). Листерии, выделенные в ходе настоящего исследования, были высокочувствительны к линезолиду (МИК составляла 60,0 мкг/мл) и рифампицину (62,5% штаммов); 22,8% штаммов показали чувствительность к гентамицину, 27,9% - к ампициллину. К препаратам других групп, чувствительность проявлялась реже (р <0,05).
В итоге, ни один препарат, не показал 100% эффективности (in vitro) к протестированным штаммам листериям, из чего следует, что необходимо проводить комплексную антибиотикотерапию листериоза - несколькими препаратами. Причем выбор препаратов должен осуществляться из вышеперечисленных групп и, только по результатам антибиотикограммы. У 1,4% клинических штаммов L.monocytogenes наблюдалась резистентность к антибиотикам.
Как известно, важным аспектом проведенного этиотропного лечения является контроль критерия излеченности - это улучшение клиники листериоза у беременных; исчезновение характерных признаков, в частности угрозы прерывания и признаков воспаления - боли, выделения; исчезновение листерий при микроскопическом и бактериологическом исследовании мазков; исход родов и т.д.
Результаты бактериологических исследований с применением новых отечественных селективных питательных сред, обладающих высокой чувствительностью и специфичностью в отношении роста культур рода Listeria, подтвержденных методами ПЦР диагностики, РНИФ и РПГА определяют целесообразность проведения комплексного обследования клинического материала тремя и более методами, которое повышает диагностическую эффективность микробиологической диагностики листериоза среди беременных и новорожденных.
Отзывы (через Facebook):
Оставить отзыв с помощью аккаунта FaceBook:
Статья в формате PDF 98 KB...
28 10 2020 23:48:32
Статья в формате PDF 274 KB...
26 10 2020 19:56:17
Статья в формате PDF 92 KB...
25 10 2020 7:44:40
Статья в формате PDF 111 KB...
24 10 2020 1:38:23
Статья в формате PDF 108 KB...
23 10 2020 18:51:44
Статья в формате PDF 128 KB...
21 10 2020 20:11:50
Статья в формате PDF 123 KB...
20 10 2020 21:31:15
Статья в формате PDF 126 KB...
19 10 2020 2:51:41
Статья в формате PDF 275 KB...
18 10 2020 18:19:38
Статья в формате PDF 109 KB...
17 10 2020 15:38:43
Статья в формате PDF 122 KB...
16 10 2020 23:19:45
Статья в формате PDF 131 KB...
15 10 2020 21:39:32
Бесплодие является одним из главным заболеванием коров. По причине непригодности к воспроизводству из стад выбывает более половины животных. По этой причине сельскохозяйственные предприятия терпят существенные убытки. В настоящее время в производстве требуются современные методы лечения, которые отличались бы высокой эффективностью, широким спектром действия, низкозатратностью. Авторы считают, что такой инновационной технологией является лечение нарушения воспроизводительной системы коров и телок с использованием метода криотерапии и озонированными гомеопатическими препаратами. ...
14 10 2020 0:20:49
Статья в формате PDF 112 KB...
13 10 2020 18:52:14
Статья в формате PDF 110 KB...
12 10 2020 21:42:38
Статья в формате PDF 117 KB...
10 10 2020 15:14:57
Статья в формате PDF 111 KB...
09 10 2020 18:56:44
Статья в формате PDF 118 KB...
08 10 2020 8:45:56
Статья в формате PDF 273 KB...
07 10 2020 14:41:55
Статья в формате PDF 115 KB...
05 10 2020 11:47:10
Статья в формате PDF 319 KB...
04 10 2020 19:19:16
Статья в формате PDF 261 KB...
03 10 2020 15:43:51
Статья в формате PDF 111 KB...
30 09 2020 2:11:50
Статья в формате PDF 92 KB...
29 09 2020 18:52:51
Статья в формате PDF 97 KB...
28 09 2020 20:11:40
Статья в формате PDF 140 KB...
27 09 2020 9:36:26
Статья в формате PDF 120 KB...
26 09 2020 5:50:29
Статья в формате PDF 392 KB...
24 09 2020 8:33:54
Статья в формате PDF 135 KB...
23 09 2020 16:45:42
Статья в формате PDF 250 KB...
22 09 2020 20:44:41
Статья в формате PDF 253 KB...
21 09 2020 0:43:19
Статья в формате PDF 130 KB...
20 09 2020 17:45:36
Статья в формате PDF 270 KB...
19 09 2020 0:55:19
Статья в формате PDF 102 KB...
18 09 2020 17:14:40
Статья в формате PDF 274 KB...
17 09 2020 0:57:18
Статья в формате PDF 110 KB...
16 09 2020 23:41:34
Статья в формате PDF 127 KB...
15 09 2020 4:55:46
Понятие время является важнейшим понятием, как физики, так и философии. Актуальность этой проблемы обусловлена тем, что до сих пор, несмотря на широкий круг исследований, не сложилось твердо закрепленного представления о времени. В статье делается попытка раскрыть сущность понятия времени и связать меру времени с движением. За меру времени механического движения предлагается выбрать путь, пройденный, например, концом стрелки часов, участвующей не только в собственном движении относительно циферблата, как это принято, но и в сложном движении, включающем движение часов как целое относительно внешнего наблюдателя. Синхронизация хода часов производится по периодам их движений в соответствие с принятым эталоном времени. Рассматривается случай, когда часы движутся относительно внешнего наблюдателя с постоянной скоростью. Такой подход к проблеме времени позволяет понять его непрерывность и бесконечность. ...
14 09 2020 22:54:27
Статья в формате PDF 253 KB...
13 09 2020 11:20:18
Статья в формате PDF 89 KB...
12 09 2020 7:32:40
Статья в формате PDF 106 KB...
11 09 2020 12:33:16
Статья в формате PDF 117 KB...
10 09 2020 11:13:35
Статья в формате PDF 329 KB...
09 09 2020 23:46:17
Статья в формате PDF 126 KB...
08 09 2020 11:40:20
Статья в формате PDF 107 KB...
07 09 2020 18:20:26
Статья в формате PDF 107 KB...
06 09 2020 22:36:48
Статья в формате PDF 90 KB...
05 09 2020 5:13:21
Статья в формате PDF 129 KB...
04 09 2020 16:13:57
Статья в формате PDF 113 KB...
03 09 2020 7:22:25
Статья в формате PDF 143 KB...
02 09 2020 17:41:36
Статья в формате PDF 115 KB...
01 09 2020 4:14:32
Статья в формате PDF 158 KB...
31 08 2020 17:36:51
Статья в формате PDF 98 KB...
29 08 2020 6:23:39
Статья в формате PDF 114 KB...
28 08 2020 3:18:38
Статья в формате PDF 835 KB...
25 08 2020 16:24:11
Изучено влияние высококремнистых природных добавок на качество птицеводческой продукции. Установлено, что включение природных добавок в рацион кур-несушек улучшает прочность скорлупы, что непосредственно ведет к снижению процента боя яиц, повышению инкубационных показателей яиц и увеличению процента вывода цыплят. ...
24 08 2020 2:51:20
Статья в формате PDF 242 KB...
22 08 2020 16:19:55
Статья в формате PDF 110 KB...
21 08 2020 23:48:35
Статья в формате PDF 123 KB...
19 08 2020 2:42:13
Статья в формате PDF 270 KB...
18 08 2020 20:57:20
Статья в формате PDF 115 KB...
17 08 2020 23:27:11
Статья в формате PDF 91 KB...
16 08 2020 12:25:40
Статья в формате PDF 109 KB...
15 08 2020 16:10:59
Статья в формате PDF 138 KB...
14 08 2020 11:45:42
Статья в формате PDF 115 KB...
13 08 2020 5:21:12
Статья в формате PDF 301 KB...
11 08 2020 1:17:14
Статья в формате PDF 98 KB...
10 08 2020 23:16:36
Статья в формате PDF 102 KB...
09 08 2020 0:57:39
Статья в формате PDF 128 KB...
08 08 2020 3:27:40
Статья в формате PDF 147 KB...
07 08 2020 18:42:49
Статья в формате PDF 118 KB...
06 08 2020 20:55:50
Статья в формате PDF 253 KB...
05 08 2020 16:22:41
Статья в формате PDF 115 KB...
04 08 2020 12:31:40
Статья в формате PDF 253 KB...
03 08 2020 3:14:54
Статья в формате PDF 365 KB...
02 08 2020 10:24:23
Статья в формате PDF 115 KB...
01 08 2020 12:32:58
Статья в формате PDF 101 KB...
31 07 2020 16:40:22
Статья в формате PDF 282 KB...
30 07 2020 14:41:19
Статья в формате PDF 125 KB...
29 07 2020 22:53:38
Статья в формате PDF 293 KB...
28 07 2020 18:22:15
Статья в формате PDF 125 KB...
27 07 2020 3:18:52
Статья в формате PDF 162 KB...
26 07 2020 3:19:57
Статья в формате PDF 103 KB...
25 07 2020 17:23:33
Статья в формате PDF 200 KB...
24 07 2020 9:26:17
Статья в формате PDF 104 KB...
23 07 2020 15:30:33
Статья в формате PDF 139 KB...
22 07 2020 21:17:55
Статья в формате PDF 113 KB...
21 07 2020 17:53:53
Статья в формате PDF 113 KB...
20 07 2020 12:59:55
Статья в формате PDF 104 KB...
19 07 2020 13:21:51
Статья в формате PDF 92 KB...
18 07 2020 21:14:28
Рассматривается проблема организации продуктивной умственной деятельности учащихся общеобразовательных учреждений в системе дидактических принципов современной педагогики. Анализ принципов показывает, что отечественная дидактика в большой мере сохраняет черты традиционной модели обучения и недостаточно учитывает психологическую природу мышления и закономерности продуктивной умственной деятельности при разработке принципов обучения. Выделены основополагающие принципы организации продуктивной умственной деятельности на основе закономерностей развития знания и процесса познания, психологических закономерностей мышления. ...
15 07 2020 19:21:35
Статья в формате PDF 113 KB...
14 07 2020 2:38:10
Статья в формате PDF 112 KB...
13 07 2020 10:41:33
Статья в формате PDF 132 KB...
12 07 2020 12:28:25
Статья в формате PDF 204 KB...
11 07 2020 11:53:55
Статья в формате PDF 137 KB...
09 07 2020 6:43:51
Статья в формате PDF 132 KB...
08 07 2020 20:47:44
Статья в формате PDF 120 KB...
07 07 2020 12:52:20
Географическое расположение и климатические условия Нижнего Поволжья, неудовлетворительная экологическая обстановка способствует росту заболеваемости мочеполовой системы у населения, проживающего в регионе. Увеличение частоты заболеваемости уратным нефролитиазом диктует необходимость поиска адекватного объема терапии по улучшению качества консервативного лечения этой патологии. Изучение особенностей симптомокомплекса уратного нефролитиаза в разных возрастных группах (25-30; 40-45; 60-70 лет) позволило научно обосновать и разработать практические рекомендации по рациональному и эффективному лечению данного вида мочекаменной болезни у пациентов с учетом их возраста. ...
05 07 2020 22:59:19
Статья в формате PDF 112 KB...
04 07 2020 13:39:40
Статья в формате PDF 103 KB...
03 07 2020 1:48:32
Статья в формате PDF 119 KB...
30 06 2020 14:31:10
Статья в формате PDF 112 KB...
29 06 2020 21:32:39
В листьях древесных пород и травянистой растительности определены корреляционные зависимости между Mn, Cr, Ni, Cu, Ti, Pb, Zn, Co в условиях геохимического фона и на колчеданных месторождениях. ...
28 06 2020 2:16:21
Статья в формате PDF 162 KB...
27 06 2020 20:52:28
В статье дано определение техническому состоянию техники, представлены виды технических состояний и процессы изменения технического состояния при эксплуатации. Бытовая техника при эксплуатации может принимать исправное и неисправное состояние, а также работоспособное и неработоспособное состояние. Показана взаимосвязь видов технических состояний в виде графа переходов технических состояний, позволяющий проводить технологию восстановления работоспособности техники. Определен порядок восстановления бытовой техники и сформулирован критерий отказа техники. Рассмотрены признаки восстановления бытовой техники по отношению к восстанавливаемой и невосстанавливаемой техники. Показано, что к невосстанавливаемой технике относится техника, нахоящаяся в предельном состоянии или в результате ресурсного отказа. Рассмотрены признаки предельного состояния для восстанавливаемой и невосстанавливаемой техники. ...
26 06 2020 5:45:46
Статья в формате PDF 156 KB...
25 06 2020 6:21:24
Статья в формате PDF 355 KB...
24 06 2020 18:13:53
Изучено влияние солей кадмия, свинца и марганца на содержание белков в сыворотке крови сеголеток карпа. Показаны разнонаправленные изменения белкового состава сыворотки крови рыб при воздействии солей тяжелых металлов, о чем можно судить на основании изменения А/G индекса. При хроническом действии ионов кадмия отмечено значительное преобладание суммарного содержания альбуминов над глобулинами на протяжении всего эксперимента, пребывание рыб в среде с ионами свинца сопровождалось более значительным ростом содержания глобулинов, тогда как при действии ионов марганца не выявлен однонаправленный характер изменения соотношения альбуминов и глобулинов. ...
22 06 2020 15:40:28
Статья в формате PDF 147 KB...
21 06 2020 18:52:25
В статье на основании анализа серий срезов зародышей человека изучены особенности формирования артериального русла отделов головного мозга, определены возрастные критерии появления закладок как отделов головного мозга, так и основных сосудов и их ветвей в плане обоснования возможных вариантов строения артериальной сети головного мозга в онтогенезе. ...
19 06 2020 12:58:22
Статья в формате PDF 118 KB...
18 06 2020 21:52:26
Статья в формате PDF 264 KB...
17 06 2020 10:48:22
Статья в формате PDF 255 KB...
16 06 2020 3:24:23
Статья в формате PDF 300 KB...
15 06 2020 13:35:19
Статья в формате PDF 125 KB...
14 06 2020 22:58:55
Статья в формате PDF 100 KB...
13 06 2020 17:27:25
Статья в формате PDF 140 KB...
12 06 2020 2:19:21
Статья в формате PDF 104 KB...
10 06 2020 13:48:39
Статья в формате PDF 115 KB...
09 06 2020 8:16:32
Статья в формате PDF 105 KB...
08 06 2020 21:25:40
Статья в формате PDF 116 KB...
07 06 2020 5:37:27
Статья в формате PDF 217 KB...
04 06 2020 3:40:27
Статья в формате PDF 136 KB...
03 06 2020 22:41:35
Статья в формате PDF 149 KB...
02 06 2020 6:59:36
Статья в формате PDF 116 KB...
01 06 2020 20:36:27
Еще:
Обзоры -1 :: Обзоры -2 :: Обзоры -3 :: Обзоры -4 :: Обзоры -5 :: Обзоры -6 :: Обзоры -7 :: Обзоры -8 :: Обзоры -9 :: Обзоры -10 :: Обзоры -11 ::
Последовательность подготовки научной работы может быть такой: