МЕТОД проточнОЙ цитометриИ В ДиагностикЕ диссеминированных опухолевых клеток в костном мозге У БОЛЬНЫХ ракОМ молочной железы
1 ФГБОУ ВПО Ульяновский государственный университет2 ГУЗ Областной клинический онкологический диспансер3 ФГБУ «Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина» Статья в формате PDF 261 KB
Диагностика гематогенного распространения эпителиальных опухолей на ранних стадиях – одна из главных проблем современной онкологии. В клинической практике пока не найдено рутинных методов обнаружения микрометастазов. Морфологически единичные разрозненные опухолевые клетки не определяются – требуется применение высокочувствительных иммунологических методов. Накапливаются данные о том, что количественное определение и характеристика диссеминированных опухолевых клеток позволяет получить важную прогностическую информацию и проводить мониторинг эффективности терапии. Для того чтобы контролировать эффективность воздействия лекарственных средств на микрометастазы нужно, в первую очередь, стандартизировать методы количественной оценки единичных диссеминированных опухолевых клеток.
Целью настоящей работы явилось установление степени гематогенной диссеминации у больных раком молочной железы (РМЖ) на основании обнаружения диссеминированных опухолевых клеток в костном мозге методом проточной цитометрии с применением моноклональных антител к эпителиальным антигенам.
Материалы и методы исследования. В работе использованы материалы клинического, морфологического, иммуноцитологического обследования 38 больных РМЖ, находящихся на лечении в ГУЗ Областной клинический онкологический диспансер г. Ульяновска с ноября 2011 г. по настоящее время. В исследуемую группы вошли женщины в возрасте от 33 до 74 лет. Средний возраст составил 56 ± 10,0 лет. На момент постановки первичного диагноза пациентки распределились по стадиям следующим образом: I стадия была диагностирована у 3 (7,9 %) больных, IIА – у 11 (29,0 %), IIВ – у 3 (7,9 %), IIIА – у 7 (18,4 %), IIIВ – у 3 (7,9 %), IIIC – у 6 (15,8 %) и IV – у 5 (13,1 %) пациенток. Наиболее частым гистологическим вариантом был инфильтративный смешанный рак (42,9 %). Отмечена достаточно высокая частота инфильтративного протокового рака (28,6 %). Реже встречались инфильтративный дольковый рак (21,4 %) и другие формы рака (медуллярный, папиллярный, тубулярный) – 7,1 %. Больным было проведено стандартное клиническое обследование. Исследование костного мозга до начала лечения выполнялось как стандартными цитологическим и гистологическим методами, так и методом проточной цитометрии с применением моноклональных антител к цитокератинам EpCAM (CD326). Материал для цитологического исследования и проточной цитометрии получали с помощью стернальной пункции. Объем костномозгового пунктата не превышал 0,5 мл, т.к. при большем объеме возможно разбавление образца периферической кровью. Проточная цитометрия проводилась на базе лаборатории иммунологии гемопоэза ФГБУ «Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина» РАМН (руководитель – д.м.н., проф. Н.Н. Тупицын). Исследование проводилось в координатах CD45/CD326. Предварительно было проведено иммуномагнитное обогащение клеток, связывающих антитела CD326 (EpCAM). Это позволило оценивать до 50 млн миелокариоцитов у одного больного. Для сравнения, иммуноцитологически на цитоцентрифужных препаратах можно оценить обычно 1–2 млн. миелокариоцитов. Подсчет клеточности костного мозга и анализ миелограмм производился в клинической лаборатории. Для гистологического исследования выполнялась трепанбиопсия задне-верхней ости подвздошной кости с двух сторон.
Результаты исследования. При стандартном цитологическом исследовании метастазы в костный мозг были выявлены у 1 (2,6 %) из 38 больных. Это пациентка, у которой IV клиническая стадия была установлена до обнаружения метастатических клеток в костном мозге (T4N3cM1, метастазы в печень, плевру). При гистологическом исследовании трепанобиоптатов подвздошной кости у данной больной было выявлено двухстороннее поражение костного мозга. В другом случае исходная стадия заболевания была расценена как IIIC (T4N3aM0), после гистологического обнаружения метастазов в костный мозг было проведено рестадирование – стадия была изменена на IV. При дополнительной остеосцинтиграфии у этой пациентки были выявлены множественные остеопластические метастазы в кости, не подтвержденные рентгенологически. У обеих пациенток метастазы в костный мозг подтверждены с помощью метода проточной цитометрии. Кроме того, у 8 из 38 больных в трепанобиоптатах были обнаружены единичные плазматические клетки или микроочаговое их скопление, что является косвенным признаком поражения костного мозга. При проточной цитометрии у 2 из этих 8 пациенток были обнаружены микрометастазы.
Единичные эпителиальные (опухолевые) клетки в образцах костного мозга были выявлены у 35 (92,1 %) из 38 пациенток с помощью проточной цитометрии с применением моноклональных антител ЕрСАМ (CD326). Важно то, что количество опухолевых клеток, определяемых иммуноцитологически, было очень низким и в 77,1 % случаев составило менее 1 клетки на 1 млн миелокариоцитов. Лишь у 8 (22,9 %) из 35 больных было выявлено от 1 до 10 (в одном случае − 44) эпителиальных клеток на 1 млн миелокариоцитов. У 1 из 8 пациенток была диагностирована I стадия заболевания, у трех пациенток – IIA стадия. У остальных четырех пациенток была установлена IV стадия РМЖ (T4N3сM1), при этом у двух из них было выявлено метастатическое поражение костного мозга в трепанобиоптатах.
Если считать положительной реакцию при наличии 1 метастатической клетки среди 1 миллиона мононуклеарных клеток (МНК) костного мозга (сумма количества лимфоцитов, моноцитов и плазматических клеток), то число таких пациенток составило 31 (88,6 %) из 35. При этом только у 4 (11,4 %) из 35 больных число клеток было ≥ 10. У трех больных было выявлено наибольшее число клеток на 1 млн. МНК – 32, 35 и 330, соответственно. Четкий кластер опухолевых клеток – микрометастаз – при проведении проточной цитометрии был диагностирован у 4 (10,5 %) из 38 пациенток. При этом в 3 из 4 случаев число клеток в образцах костного мозга было очень низким и составило менее 1 клетки на 1 млн миелокариоцитов. Таким образом, метод проточной цитометрии в сочетании с иммуномагнитным обогащением популяции опухолевых клеток позволил диагностировать микрометастазы у 11 (28,9 %) из 38 больных.
Рядом ученых было показано, что количество рецидивов рака молочной железы резко возрастает при обнаружении в костном мозге 10 или 15 изолированных опухолевых клеток. В нашем исследовании не была прослежена общая и безрецидивная выживаемость в связи с небольшим сроком от начала исследования. Выявленные изменения в миелограммах пока не показали ассоциации этих признаков с присутствием отдельных опухолевых клеток в костном мозге. Работа в данном направлении будет продолжена.
Выводы. Возможность выявления единичных опухолевых клеток в костном мозге вследствие большей чувствительности является главным преимуществом метода проточной цитометрии в диагностике диссеминированных опухолевых клеток рака молочной железы в костном мозге по сравнению с морфологическими методами исследования: в 11 (28,9 %) и 2 (5,2 %) случаях из 38, соответственно. В тоже время обнаружение малого количества опухолевых клеток сложно трактовать в тех случаях, где они не формируют четкого кластера. При наличии такого кластера микрометастазы могут быть констатированы даже при наличии менее 1 опухолевой клетки на 1 миллион миелокариоцитов. Нет четких данных о том, какова «критическая» опухолевая нагрузка костного мозга, превышение которой было бы связано с ростом частоты рецидива заболевания. Получение ответов на эти вопросы станет важным шагом на пути к индивидуализации антиметастатической терапии.
Отзывы (через Facebook):
Оставить отзыв с помощью аккаунта FaceBook:
Статья в формате PDF 1797 KB...
07 08 2020 11:42:33
Статья в формате PDF 452 KB...
06 08 2020 4:23:38
Статья в формате PDF 113 KB...
04 08 2020 12:57:41
Статья в формате PDF 113 KB...
03 08 2020 10:22:36
Статья в формате PDF 266 KB...
02 08 2020 9:37:27
Статья в формате PDF 102 KB...
01 08 2020 9:56:25
В результате проведенного исследования установлено, что одними из ведущих патогенетических факторов течения половых инфекций являются нарушения в деятельности иммунной системы. В процессе исследования выявлены изменения в клеточном иммунитете, свидетельствующие о наличии супрессии Т - клеточного звена и наличии диссиммуноглобулинемии. Выявлено, что наиболее выраженные изменения в системе клеточного и гуморального иммунитета обнаружены у больных с хроническим течением инфекционного процесса. ...
31 07 2020 12:56:40
Статья в формате PDF 285 KB...
30 07 2020 7:24:34
Статья в формате PDF 114 KB...
29 07 2020 4:11:47
Статья в формате PDF 128 KB...
28 07 2020 2:46:12
Статья в формате PDF 146 KB...
27 07 2020 21:24:29
Статья в формате PDF 384 KB...
26 07 2020 21:37:34
Статья в формате PDF 107 KB...
25 07 2020 5:17:34
Статья в формате PDF 120 KB...
24 07 2020 10:21:36
Статья в формате PDF 135 KB...
23 07 2020 0:38:12
Статья в формате PDF 224 KB...
22 07 2020 15:45:36
Статья в формате PDF 130 KB...
21 07 2020 4:21:41
Статья в формате PDF 129 KB...
20 07 2020 3:33:28
Статья в формате PDF 113 KB...
19 07 2020 14:18:10
Статья в формате PDF 117 KB...
18 07 2020 4:21:46
Статья в формате PDF 90 KB...
17 07 2020 18:21:23
Статья в формате PDF 137 KB...
16 07 2020 2:23:55
В статье отражены результаты комплексного исследования подготовленности спортсменок, специализирующихся в беге на 300-400 м с барьерами. Дан анализ статистически достоверных различий по педагогическим, физиологическим и биометрическим показателям в ответственейший момент спортивной карьеры - момент перехода с «детской» дистанции (бега на 300 м с барьерами) на олимпийскую дисциплину (400 м с барьерами). Выявлены взаимосвязи между различными сторонами подготовленности: физической, функциональной и технической. Представленный материал можно использовать в виде модельных характеристик для девушек в возрасте 15-16 лет и закономерностей становления спортивного мастерства при уточнении Учебной программы для детско-юношеских спортивных школ, специализированных детско-юношеских школ олимпийского резерва и школ высшего спортивного мастерства по разделу « Барьерный бег». ...
15 07 2020 16:31:56
Статья в формате PDF 640 KB...
14 07 2020 1:47:11
Статья в формате PDF 288 KB...
13 07 2020 6:39:48
Статья в формате PDF 146 KB...
12 07 2020 16:56:30
Статья в формате PDF 239 KB...
11 07 2020 1:38:54
Обучение взрослых дипломированных специалистов существенно отличается от обучения студентов. Если на додипломном уровне приемлема педагогическая модель обучения с доминантой обучающего, то на этапе же последипломного образования необходимо руководствоваться продуктивной андрагогической моделью обучения. Её главный постулат: обучающийся – ведущее звено в процессе образования. Исходя из этого, в течение ряд лет мы используем методику психологического типирования личности американского исследователя Д. Кейрси. И на основании выявления уровней подготовки, психофизиологических и личностных особенностей обучающихся практикуем деловые игры, мастер-классы, создание взрослыми обучающимися порт-фолио непосредственно на рабочем месте. Результаты положительные. ...
10 07 2020 3:53:19
Статья в формате PDF 110 KB...
09 07 2020 9:46:47
Статья в формате PDF 319 KB...
07 07 2020 17:42:39
Статья в формате PDF 255 KB...
06 07 2020 5:17:55
Статья в формате PDF 106 KB...
05 07 2020 17:25:10
Статья в формате PDF 281 KB...
04 07 2020 22:35:45
Статья в формате PDF 115 KB...
03 07 2020 12:51:40
Статья в формате PDF 136 KB...
02 07 2020 22:17:16
Статья в формате PDF 127 KB...
01 07 2020 7:32:45
Статья в формате PDF 100 KB...
30 06 2020 15:18:16
В статье излагается позиция автора о необходимости максимально ответственно относиться к своему здоровью, исходя из объективных предпосылок нашего времени. ...
29 06 2020 22:55:12
Статья в формате PDF 129 KB...
28 06 2020 17:19:17
Статья в формате PDF 102 KB...
27 06 2020 7:17:35
Статья в формате PDF 167 KB...
25 06 2020 7:18:52
Статья в формате PDF 107 KB...
24 06 2020 14:32:47
Статья в формате PDF 120 KB...
23 06 2020 11:48:38
Статья в формате PDF 125 KB...
22 06 2020 12:31:32
Статья в формате PDF 102 KB...
17 06 2020 11:17:13
Статья в формате PDF 196 KB...
16 06 2020 21:20:19
Статья в формате PDF 114 KB...
15 06 2020 12:12:47
Статья в формате PDF 104 KB...
14 06 2020 21:36:20
Статья в формате PDF 111 KB...
12 06 2020 6:10:13
Статья в формате PDF 106 KB...
11 06 2020 11:11:30
В статье описывается математическая модель, связывающая уровень психической реакции с личностными характеристиками человека и с силой информационного воздействия на него. Исследуются условия устойчивости модели методами теории автоматического управления. ...
10 06 2020 23:49:25
Статья в формате PDF 255 KB...
08 06 2020 11:42:13
Статья в формате PDF 123 KB...
07 06 2020 5:16:16
Статья в формате PDF 391 KB...
06 06 2020 22:28:19
Статья в формате PDF 303 KB...
05 06 2020 13:35:25
Статья в формате PDF 119 KB...
04 06 2020 8:45:26
Статья в формате PDF 116 KB...
03 06 2020 6:10:33
Статья в формате PDF 129 KB...
02 06 2020 7:53:33
Установлены специфические особенности микробного населения почв мерзлотных горно-таежных техногенных ландшафтов Эльконского ураново-рудного района на территории Южной Якутии. Такие как высокая численность эколого-трофических групп микроорганизмов (2,0·103–7,6·107 кл/г), сопоставимая с плотностью микробов в лугово-степных почвах Центральной Якутии и особый характер распределения их по профилю почв в зависимости от содержания в них урана. В почве радиоактивно-загрязненного разреза с уменьшением содержания урана до 161 мг/кг наблюдается увеличение численности всех исследованных групп микроорганизмов. В остальных образцах данного разреза с увеличением содержания урана в почве наблюдается исчезновение или спад численности микроорганизмов на 1–2 порядка. В отличие от загрязненного разреза в почве нативного ландшафта численность микроорганизмов остается достаточно высокой по всему почвенному профилю. ...
01 06 2020 22:11:31
Статья в формате PDF 102 KB...
29 05 2020 14:50:10
Статья в формате PDF 294 KB...
28 05 2020 4:49:15
Статья в формате PDF 299 KB...
27 05 2020 8:41:22
Статья в формате PDF 109 KB...
26 05 2020 16:29:28
Получены уравнения конвекции и конвективной диффузии двухкомпонентных смесей в магнитном поле. Исследованы различные частные случаи. Решена задача о конвективном движении смеси вблизи вертикальной пластины, на поверхности которой происходит гетерогенная химическая реакция. Библиогр. 4 назв. ...
25 05 2020 17:20:48
Статья в формате PDF 103 KB...
24 05 2020 10:53:57
Статья в формате PDF 135 KB...
23 05 2020 13:56:22
Статья в формате PDF 129 KB...
22 05 2020 2:36:57
Статья в формате PDF 256 KB...
21 05 2020 18:32:49
Статья в формате PDF 105 KB...
20 05 2020 14:37:16
Статья в формате PDF 86 KB...
19 05 2020 9:32:54
Статья в формате PDF 86 KB...
18 05 2020 14:39:38
Статья в формате PDF 119 KB...
17 05 2020 10:31:11
Статья в формате PDF 96 KB...
16 05 2020 1:20:26
Статья в формате PDF 250 KB...
15 05 2020 13:41:57
Статья в формате PDF 87 KB...
14 05 2020 16:51:14
Статья в формате PDF 835 KB...
13 05 2020 5:11:32
Статья в формате PDF 293 KB...
12 05 2020 0:59:18
Статья в формате PDF 256 KB...
11 05 2020 8:36:17
Статья в формате PDF 213 KB...
09 05 2020 3:48:52
Статья в формате PDF 115 KB...
08 05 2020 15:11:20
Статья посвящена актуальной проблеме – влиянию хронической алкогольной интоксикации на изменение структуры капсулы селезенки в раннем постнатальном онтогенезе. Дана сравнительная гистологическая характеристика капсулы с учетом зависимости изменений от различной концентрации потребляемого алкоголя. ...
07 05 2020 9:40:15
Статья в формате PDF 202 KB...
06 05 2020 13:35:10
Статья в формате PDF 119 KB...
05 05 2020 8:18:34
Статья в формате PDF 160 KB...
04 05 2020 6:32:11
Статья в формате PDF 98 KB...
03 05 2020 23:44:35
Статья в формате PDF 101 KB...
30 04 2020 21:12:25
Статья в формате PDF 704 KB...
28 04 2020 11:28:34
Статья в формате PDF 117 KB...
27 04 2020 12:59:20
В листьях древесных пород и травянистой растительности определены корреляционные зависимости между Mn, Cr, Ni, Cu, Ti, Pb, Zn, Co в условиях геохимического фона и на колчеданных месторождениях. ...
26 04 2020 17:16:48
Статья в формате PDF 132 KB...
25 04 2020 14:46:45
Статья в формате PDF 104 KB...
24 04 2020 18:17:19
Статья в формате PDF 129 KB...
23 04 2020 0:13:23
На основании диагностических признаков приводятся доказательства, указывающие на то, что Chytridiomycosis существует в популяциях Rana arvalis на Среднем Урале. Показана методика обнаружения заболевания по аномалиям ротового аппарата личинок и отслеживания динамики частоты встречаемости его в популяции. В экстремальных условиях инфекция поражает ослабленных и ведет к их выбраковке, что приводит к ускорению адаптации популяции в целом в быстро изменяемой среде. ...
22 04 2020 10:42:20
Статья в формате PDF 261 KB...
20 04 2020 4:14:23
Работа подъема тела в однородном поле силы тяжести всегда больше потенциальной энергии . Для минимизации работы силой тяги, равной , необходимо отключать силу тяги на некоторой высоте . Дальнейшее движение вверх до высоты происходит по инерции. Только в случае работа подъема будет стремиться к минимальному значению, равному . ...
19 04 2020 6:26:51
Статья в формате PDF 104 KB...
18 04 2020 16:31:30
Статья в формате PDF 266 KB...
17 04 2020 14:27:36
Статья в формате PDF 170 KB...
15 04 2020 15:53:31
Статья в формате PDF 109 KB...
14 04 2020 20:10:34
В костном мозге больных гематологическими заболеваниями выявлено значительное количество эритроклазических кластеров, характеризующихся экзоцитарным лизисом входящих в них эритроцитов кластерообразующими миелокариоцитами разных видов, включая эритрокариоциты. Содержание эритроклазических кластеров с происходящим в них экзоцитарным лизисом эритроцитов варьировало от 21% от всех эритроклазических кластеров в костном мозге больных апластической анемией до 81% в костном мозге больных в активной фазе острого лимфобластного лейкоза, что свидетельствует об интенсивности лизиса в них эритроцитов. С наибольшей интенсивностью лизис эритроцитов происходил в костном мозге больных в активную фазу острого лимфобластного лейкоза и больных хроническим миелолейкозом. При этом в момент исследования подвергались деструкции в эритроклазических кластеров десятки тысяч эритроцитов в мкл костного мозга. Эти данные подтверждают представление о костном мозге как органе гемолиза. ...
13 04 2020 13:14:47
Изучение иммунитета при стрессе является правомерным в оценке адаптивных систем организма и его резервных возможностей. На основании анализа функциональных возможностей иммунитета можно воздействовать на адаптивные системы и прогнозировать течение стресс-реакции. ...
12 04 2020 2:21:51
В статье рассмотрен кластерный подход к структурированию экономики и обоснованию стратегий региональной экономической политики повышения качества кластера процессов жизнеобеспечения. ...
11 04 2020 18:36:22
Статья в формате PDF 418 KB...
10 04 2020 1:58:55
В статье описаны способы гравитационного извлечения мелкого золота из золотосодержащего минерального сырья в аппаратах лоткового типа, показан механизм движения и распределения частичек относительно их удельного веса в потоках перерабатываемой пульпы. Даны предпосылки для создания необходимых устройств с целью осуществления описанных способов. ...
09 04 2020 6:38:24
Статья в формате PDF 268 KB...
08 04 2020 11:55:44
Статья в формате PDF 271 KB...
07 04 2020 10:29:33
Статья в формате PDF 162 KB...
06 04 2020 2:24:45
Статья в формате PDF 95 KB...
05 04 2020 23:14:45
Статья в формате PDF 126 KB...
04 04 2020 6:11:54
Статья в формате PDF 257 KB...
02 04 2020 15:13:18
Способ глазомерного учета выхода сортиментов из деревьев лесного древостоя широко применялся в дореволюционное время под названием коммерческая таксация. Исходя из биотехнического принципа в лесной экономике показана возможность выполнения коммерческой таксации древостоя моделированием стоимостных и возрастных распределений лесных деревьев по текущим рыночным ценам на круглые лесоматериалы. ...
01 04 2020 15:48:10
Статья в формате PDF 110 KB...
31 03 2020 6:20:57
Статья в формате PDF 120 KB...
30 03 2020 21:55:18
В современных условиях жизни требуются люди, знакомые с экологическими проблемами. В этой работе рассматриваются несколько нетрадиционные, но очень эффективные способы соединения экообразования детей и развития творческой индивидуальности посредством уроков флористики. Творчество флористов базируется на использовании самых необычных комбинаций искусно высушенных цветков и некоторых других частей растений, сохраняющих исходную форму и цвет. Изучая принципы флористики, ребёнок узнаёт как об экологических проблемах, так и о флоре и фауне, и учится ценить красоту и гармонию мира как источник личных черт и творческих способностей. ...
29 03 2020 20:50:55
Статья в формате PDF 249 KB...
28 03 2020 19:41:27
Статья в формате PDF 106 KB...
27 03 2020 19:47:42
Статья в формате PDF 261 KB...
24 03 2020 9:42:33
В статье говорится о видах парадействий в языке и исследованиях невербальных элементов в языкознании. ...
23 03 2020 6:20:50
Статья в формате PDF 106 KB...
22 03 2020 10:39:46
Статья в формате PDF 125 KB...
21 03 2020 3:25:43
Статья в формате PDF 97 KB...
20 03 2020 4:51:24
Статья в формате PDF 123 KB...
19 03 2020 8:52:16
Статья в формате PDF 115 KB...
18 03 2020 18:42:24
В статье даны практические рекомендации для проектирования вибратора грохота, который по технологическим соображениям был переведён в режим работы с повышенной частотой вращения и уменьшенной амплитудой. Разработана динамическая схема грохота и предложен алгоритм решения дифференциального уравнения. Короб грохота рассматривался как одномассная система с элементами переменной жесткости опор короба, что позволило определить требуемую возмущающую силу вибратора и величину статического момента массы дебалансов при заданных кинематических параметрах. На основе полученных результатов разработана рациональная конструкция дебалансов. ...
17 03 2020 11:57:10
Статья в формате PDF 111 KB...
15 03 2020 19:17:19
Статья в формате PDF 111 KB...
14 03 2020 4:11:42
Статья в формате PDF 111 KB...
13 03 2020 0:21:52
Статья в формате PDF 108 KB...
12 03 2020 7:16:23
Статья в формате PDF 104 KB...
11 03 2020 15:34:43
Еще:
Обзоры -1 :: Обзоры -2 :: Обзоры -3 :: Обзоры -4 :: Обзоры -5 :: Обзоры -6 :: Обзоры -7 :: Обзоры -8 :: Обзоры -9 :: Обзоры -10 :: Обзоры -11 ::
Последовательность подготовки научной работы может быть такой: