МЕТОД проточнОЙ цитометриИ В ДиагностикЕ диссеминированных опухолевых клеток в костном мозге У БОЛЬНЫХ ракОМ молочной железы
Источник:
1 ФГБОУ ВПО Ульяновский государственный университет2 ГУЗ Областной клинический онкологический диспансер3 ФГБУ «Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина» Статья в формате PDF 261 KB
Диагностика гематогенного распространения эпителиальных опухолей на ранних стадиях – одна из главных проблем современной онкологии. В клинической практике пока не найдено рутинных методов обнаружения микрометастазов. Морфологически единичные разрозненные опухолевые клетки не определяются – требуется применение высокочувствительных иммунологических методов. Накапливаются данные о том, что количественное определение и характеристика диссеминированных опухолевых клеток позволяет получить важную прогностическую информацию и проводить мониторинг эффективности терапии. Для того чтобы контролировать эффективность воздействия лекарственных средств на микрометастазы нужно, в первую очередь, стандартизировать методы количественной оценки единичных диссеминированных опухолевых клеток.
Целью настоящей работы явилось установление степени гематогенной диссеминации у больных раком молочной железы (РМЖ) на основании обнаружения диссеминированных опухолевых клеток в костном мозге методом проточной цитометрии с применением моноклональных антител к эпителиальным антигенам.
Материалы и методы исследования. В работе использованы материалы клинического, морфологического, иммуноцитологического обследования 38 больных РМЖ, находящихся на лечении в ГУЗ Областной клинический онкологический диспансер г. Ульяновска с ноября 2011 г. по настоящее время. В исследуемую группы вошли женщины в возрасте от 33 до 74 лет. Средний возраст составил 56 ± 10,0 лет. На момент постановки первичного диагноза пациентки распределились по стадиям следующим образом: I стадия была диагностирована у 3 (7,9 %) больных, IIА – у 11 (29,0 %), IIВ – у 3 (7,9 %), IIIА – у 7 (18,4 %), IIIВ – у 3 (7,9 %), IIIC – у 6 (15,8 %) и IV – у 5 (13,1 %) пациенток. Наиболее частым гистологическим вариантом был инфильтративный смешанный рак (42,9 %). Отмечена достаточно высокая частота инфильтративного протокового рака (28,6 %). Реже встречались инфильтративный дольковый рак (21,4 %) и другие формы рака (медуллярный, папиллярный, тубулярный) – 7,1 %. Больным было проведено стандартное клиническое обследование. Исследование костного мозга до начала лечения выполнялось как стандартными цитологическим и гистологическим методами, так и методом проточной цитометрии с применением моноклональных антител к цитокератинам EpCAM (CD326). Материал для цитологического исследования и проточной цитометрии получали с помощью стернальной пункции. Объем костномозгового пунктата не превышал 0,5 мл, т.к. при большем объеме возможно разбавление образца периферической кровью. Проточная цитометрия проводилась на базе лаборатории иммунологии гемопоэза ФГБУ «Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина» РАМН (руководитель – д.м.н., проф. Н.Н. Тупицын). Исследование проводилось в координатах CD45/CD326. Предварительно было проведено иммуномагнитное обогащение клеток, связывающих антитела CD326 (EpCAM). Это позволило оценивать до 50 млн миелокариоцитов у одного больного. Для сравнения, иммуноцитологически на цитоцентрифужных препаратах можно оценить обычно 1–2 млн. миелокариоцитов. Подсчет клеточности костного мозга и анализ миелограмм производился в клинической лаборатории. Для гистологического исследования выполнялась трепанбиопсия задне-верхней ости подвздошной кости с двух сторон.
Результаты исследования. При стандартном цитологическом исследовании метастазы в костный мозг были выявлены у 1 (2,6 %) из 38 больных. Это пациентка, у которой IV клиническая стадия была установлена до обнаружения метастатических клеток в костном мозге (T4N3cM1, метастазы в печень, плевру). При гистологическом исследовании трепанобиоптатов подвздошной кости у данной больной было выявлено двухстороннее поражение костного мозга. В другом случае исходная стадия заболевания была расценена как IIIC (T4N3aM0), после гистологического обнаружения метастазов в костный мозг было проведено рестадирование – стадия была изменена на IV. При дополнительной остеосцинтиграфии у этой пациентки были выявлены множественные остеопластические метастазы в кости, не подтвержденные рентгенологически. У обеих пациенток метастазы в костный мозг подтверждены с помощью метода проточной цитометрии. Кроме того, у 8 из 38 больных в трепанобиоптатах были обнаружены единичные плазматические клетки или микроочаговое их скопление, что является косвенным признаком поражения костного мозга. При проточной цитометрии у 2 из этих 8 пациенток были обнаружены микрометастазы.
Единичные эпителиальные (опухолевые) клетки в образцах костного мозга были выявлены у 35 (92,1 %) из 38 пациенток с помощью проточной цитометрии с применением моноклональных антител ЕрСАМ (CD326). Важно то, что количество опухолевых клеток, определяемых иммуноцитологически, было очень низким и в 77,1 % случаев составило менее 1 клетки на 1 млн миелокариоцитов. Лишь у 8 (22,9 %) из 35 больных было выявлено от 1 до 10 (в одном случае − 44) эпителиальных клеток на 1 млн миелокариоцитов. У 1 из 8 пациенток была диагностирована I стадия заболевания, у трех пациенток – IIA стадия. У остальных четырех пациенток была установлена IV стадия РМЖ (T4N3сM1), при этом у двух из них было выявлено метастатическое поражение костного мозга в трепанобиоптатах.
Если считать положительной реакцию при наличии 1 метастатической клетки среди 1 миллиона мононуклеарных клеток (МНК) костного мозга (сумма количества лимфоцитов, моноцитов и плазматических клеток), то число таких пациенток составило 31 (88,6 %) из 35. При этом только у 4 (11,4 %) из 35 больных число клеток было ≥ 10. У трех больных было выявлено наибольшее число клеток на 1 млн. МНК – 32, 35 и 330, соответственно. Четкий кластер опухолевых клеток – микрометастаз – при проведении проточной цитометрии был диагностирован у 4 (10,5 %) из 38 пациенток. При этом в 3 из 4 случаев число клеток в образцах костного мозга было очень низким и составило менее 1 клетки на 1 млн миелокариоцитов. Таким образом, метод проточной цитометрии в сочетании с иммуномагнитным обогащением популяции опухолевых клеток позволил диагностировать микрометастазы у 11 (28,9 %) из 38 больных.
Рядом ученых было показано, что количество рецидивов рака молочной железы резко возрастает при обнаружении в костном мозге 10 или 15 изолированных опухолевых клеток. В нашем исследовании не была прослежена общая и безрецидивная выживаемость в связи с небольшим сроком от начала исследования. Выявленные изменения в миелограммах пока не показали ассоциации этих признаков с присутствием отдельных опухолевых клеток в костном мозге. Работа в данном направлении будет продолжена.
Выводы. Возможность выявления единичных опухолевых клеток в костном мозге вследствие большей чувствительности является главным преимуществом метода проточной цитометрии в диагностике диссеминированных опухолевых клеток рака молочной железы в костном мозге по сравнению с морфологическими методами исследования: в 11 (28,9 %) и 2 (5,2 %) случаях из 38, соответственно. В тоже время обнаружение малого количества опухолевых клеток сложно трактовать в тех случаях, где они не формируют четкого кластера. При наличии такого кластера микрометастазы могут быть констатированы даже при наличии менее 1 опухолевой клетки на 1 миллион миелокариоцитов. Нет четких данных о том, какова «критическая» опухолевая нагрузка костного мозга, превышение которой было бы связано с ростом частоты рецидива заболевания. Получение ответов на эти вопросы станет важным шагом на пути к индивидуализации антиметастатической терапии.
Отзывы (через Facebook):
Оставить отзыв с помощью аккаунта FaceBook:
Статья в формате PDF 131 KB...
26 02 2021 15:23:34
Статья в формате PDF 301 KB...
25 02 2021 8:48:41
Статья в формате PDF 132 KB...
23 02 2021 0:10:55
Статья в формате PDF 137 KB...
21 02 2021 4:24:41
Статья в формате PDF 97 KB...
20 02 2021 10:27:10
Статья в формате PDF 221 KB...
19 02 2021 2:32:27
Статья в формате PDF 137 KB...
18 02 2021 11:27:21
Статья в формате PDF 111 KB...
17 02 2021 19:35:15
Статья в формате PDF 100 KB...
16 02 2021 1:11:35
Статья в формате PDF 112 KB...
14 02 2021 21:15:13
Статья в формате PDF 134 KB...
13 02 2021 8:42:57
Территориальные различия электоральных предпочтений отличаются высокой устойчивостью в современной России. Этот феномен подтверждается методом корреляционного анализа. Выделяются шесть основных социальных факторов, влияющих на различия в электоральной географии: 1) доля городского населения; 2) приближенность к центру; 3) этнический фактор; 4) доля молодежи в составе населения; 5) преобладающие виды деятельности населения; 6) структура социальных связей. Электоральное поведение в России менее индивидуально, чем в западных странах, большее значение имеют объективные социальные факторы. ...
11 02 2021 12:31:17
Статья в формате PDF 91 KB...
10 02 2021 8:57:54
Статья в формате PDF 255 KB...
09 02 2021 17:34:19
Статья в формате PDF 120 KB...
08 02 2021 21:47:10
Разработан пакет графических алгоритмических моделей отбраковочных испытаний радиоприемных устройств, изготавливаемых и выпускаемых предприятием, как первый шаг к последующей автоматизации. Показано преимущество разработанных моделей по сравнению с действующей текстовой инструкцией по проведению испытаний. ...
07 02 2021 18:25:21
Статья в формате PDF 101 KB...
06 02 2021 0:26:59
Статья в формате PDF 147 KB...
05 02 2021 1:55:32
В статье рассмотрен прцесс химического никелирования деталей машин и оборудования как эффетивный и экономически выгодный способ получения стойких покрытий. Предлагается внедрить этот процесс в технологию восстановления деталей автотракторной техники из алюминиевых сплавов. ...
04 02 2021 1:26:39
Статья в формате PDF 345 KB...
02 02 2021 13:51:56
Статья в формате PDF 304 KB...
01 02 2021 21:48:57
Статья в формате PDF 112 KB...
31 01 2021 6:36:30
Статья в формате PDF 123 KB...
30 01 2021 14:47:11
Статья в формате PDF 111 KB...
29 01 2021 9:30:46
Статья в формате PDF 94 KB...
28 01 2021 14:33:39
Статья в формате PDF 91 KB...
27 01 2021 10:56:11
Статья в формате PDF 241 KB...
25 01 2021 23:46:47
Статья в формате PDF 119 KB...
24 01 2021 10:35:17
Статья в формате PDF 104 KB...
23 01 2021 7:29:25
Статья в формате PDF 132 KB...
21 01 2021 2:37:52
В статье описываются математические модели в виде уравнения регрессии, которое позволяет по клиническим признакам хронической сердечной недостаточности со статистической достоверностью предсказать результаты 6-минутного теста. ...
20 01 2021 12:29:49
Статья в формате PDF 116 KB...
19 01 2021 7:42:58
Статья в формате PDF 145 KB...
18 01 2021 21:32:18
Статья в формате PDF 124 KB...
17 01 2021 12:40:27
Статья в формате PDF 110 KB...
16 01 2021 17:59:24
Статья в формате PDF 119 KB...
15 01 2021 15:32:52
Статья в формате PDF 142 KB...
14 01 2021 16:17:46
Статья в формате PDF 263 KB...
13 01 2021 18:12:50
Статья в формате PDF 129 KB...
12 01 2021 21:49:41
Рассматриваются особенности изменения растительности и почв на протяжении пяти историко-экологических этапов трансформации восточноевропейских степей во второй половине голоцена. Получены оценки поступающей в почву фитомассы, величина изымаемой продукции (в массовом выражении и через энергетические эквиваленты), а также величины энергии, формируемой в процессе гумусообразования. Установлено, что за 5000 лет отношение энергии расхода-прихода растительного вещества изменилось от 1:28 до 1:0,4, а ежегодное поступление гумуса в почвы снизилось с 5,4 до 1,6 М Дж/кв. м. ...
11 01 2021 21:53:15
Статья в формате PDF 246 KB...
10 01 2021 14:20:59
Статья в формате PDF 261 KB...
09 01 2021 20:10:38
Статья в формате PDF 144 KB...
08 01 2021 15:14:40
Статья в формате PDF 304 KB...
06 01 2021 2:15:36
Статья в формате PDF 152 KB...
04 01 2021 12:59:50
После 30 дней адаптации к холоду прессорное действие мезатона на артериальное русло тонкого кишечника уменьшается исключительно за счет снижения чувствительности а1-адренорецепторов на 21 %, а количество активных а1-адренорецепторов нормализовалось. В артериях конечности изменения чувствительности и количества а1-адренорецепторов артерий к мезатону было противоположно кишечнику. Чувствительность а1-адренорецепторов артерий конечности к мезатону нормализовалась и была равна контролю. А количества активных альфа-1-адренорецепторов артерий кожно-мышечной области к мезатону было меньше контроля на 10,3 %. ...
03 01 2021 9:26:46
Статья в формате PDF 101 KB...
02 01 2021 4:16:59
Представлена система управления в формализованном виде, что облегчает анализ свойств системы, позволяет намечать пути ее совершенствования. ...
01 01 2021 19:34:18
Статья в формате PDF 121 KB...
31 12 2020 22:38:21
Статья в формате PDF 132 KB...
29 12 2020 4:51:37
Статья в формате PDF 100 KB...
28 12 2020 4:32:32
Статья в формате PDF 277 KB...
27 12 2020 10:10:59
Статья в формате PDF 133 KB...
26 12 2020 23:43:19
Статья в формате PDF 256 KB...
25 12 2020 7:11:35
Статья в формате PDF 112 KB...
24 12 2020 21:17:21
Статья в формате PDF 119 KB...
23 12 2020 5:57:42
Статья в формате PDF 126 KB...
22 12 2020 11:56:49
Статья в формате PDF 87 KB...
21 12 2020 12:18:11
Статья в формате PDF 257 KB...
20 12 2020 14:33:18
Статья в формате PDF 276 KB...
19 12 2020 6:43:52
Статья в формате PDF 96 KB...
18 12 2020 15:59:17
Статья в формате PDF 132 KB...
16 12 2020 0:57:46
Статья в формате PDF 96 KB...
15 12 2020 3:35:47
Статья в формате PDF 125 KB...
14 12 2020 3:45:23
Статья в формате PDF 224 KB...
13 12 2020 18:50:26
Статья в формате PDF 119 KB...
12 12 2020 20:48:21
Статья в формате PDF 146 KB...
11 12 2020 23:42:11
Статья в формате PDF 107 KB...
10 12 2020 1:21:52
Статья в формате PDF 126 KB...
09 12 2020 7:19:53
Статья в формате PDF 110 KB...
07 12 2020 17:42:32
Статья в формате PDF 132 KB...
06 12 2020 12:35:53
Статья в формате PDF 131 KB...
05 12 2020 8:13:20
Статья в формате PDF 99 KB...
04 12 2020 7:58:20
Статья в формате PDF 113 KB...
03 12 2020 11:37:16
Статья в формате PDF 102 KB...
02 12 2020 11:29:32
Статья в формате PDF 107 KB...
30 11 2020 15:15:17
Система дополнительного экологического образования, базирующаяся на использовании современных педагогических моделей личностно-ориентированного обучения; применении передовых образовательных технологий, активных методов и форм полевой экологии, проектной деятельности, вовлечении в общественно-значимую исследовательскую и практическую работу, создает оптимальные условия для развития креативных способностей одаренных детей в естественнонаучной области. ...
29 11 2020 11:27:15
Статья в формате PDF 101 KB...
28 11 2020 19:52:58
Статья в формате PDF 206 KB...
27 11 2020 15:42:17
Статья в формате PDF 163 KB...
26 11 2020 12:12:13
Статья в формате PDF 115 KB...
25 11 2020 4:41:55
Статья в формате PDF 113 KB...
24 11 2020 13:40:23
Статья в формате PDF 149 KB...
23 11 2020 22:51:18
Статья в формате PDF 207 KB...
22 11 2020 11:54:13
Статья в формате PDF 312 KB...
21 11 2020 11:22:28
Статья в формате PDF 116 KB...
20 11 2020 7:50:22
Статья в формате PDF 124 KB...
19 11 2020 11:53:20
Статья в формате PDF 134 KB...
18 11 2020 3:53:24
Статья в формате PDF 109 KB...
17 11 2020 14:24:21
Статья в формате PDF 274 KB...
16 11 2020 2:50:38
Статья в формате PDF 111 KB...
15 11 2020 22:26:29
Статья в формате PDF 106 KB...
14 11 2020 16:11:57
Статья в формате PDF 124 KB...
12 11 2020 7:59:55
Статья в формате PDF 239 KB...
11 11 2020 5:20:36
Статья в формате PDF 252 KB...
10 11 2020 15:13:32
Статья в формате PDF 161 KB...
09 11 2020 4:22:17
Статья в формате PDF 116 KB...
08 11 2020 11:18:43
Статья в формате PDF 110 KB...
07 11 2020 10:13:37
Статья в формате PDF 250 KB...
06 11 2020 16:11:18
Статья в формате PDF 129 KB...
04 11 2020 2:20:24
Статья в формате PDF 138 KB...
03 11 2020 9:56:20
Статья в формате PDF 85 KB...
02 11 2020 12:26:29
Статья в формате PDF 102 KB...
31 10 2020 11:50:49
Статья в формате PDF 107 KB...
30 10 2020 16:33:10
Статья в формате PDF 122 KB...
29 10 2020 15:11:53
Статья в формате PDF 104 KB...
28 10 2020 13:49:45
Статья в формате PDF 148 KB...
27 10 2020 6:44:16
Статья в формате PDF 101 KB...
26 10 2020 5:11:43
Статья в формате PDF 441 KB...
25 10 2020 7:38:10
Статья в формате PDF 281 KB...
23 10 2020 7:38:47
Статья в формате PDF 311 KB...
22 10 2020 18:27:46
Статья в формате PDF 134 KB...
21 10 2020 4:23:27
Статья в формате PDF 101 KB...
19 10 2020 8:19:10
Статья в формате PDF 722 KB...
18 10 2020 13:37:20
Статья в формате PDF 160 KB...
17 10 2020 5:57:56
Статья в формате PDF 106 KB...
16 10 2020 11:14:27
Статья в формате PDF 250 KB...
14 10 2020 3:34:28
Статья в формате PDF 119 KB...
13 10 2020 23:11:15
Статья в формате PDF 122 KB...
12 10 2020 10:19:28
Статья в формате PDF 255 KB...
11 10 2020 21:33:36
В статье изложены результаты исследования содержания таких биоэнергетически активных компонентов-углеводов и липидов в организме Trichocephalus trichiurus,Tr.muris в норме и после применения принятых терапевтических дозах Вермокса, Медамина и Дифезила. ...
10 10 2020 16:31:18
Статья в формате PDF 113 KB...
09 10 2020 4:20:54
Статья в формате PDF 114 KB...
08 10 2020 9:37:47
Статья в формате PDF 107 KB...
07 10 2020 22:14:48
Статья в формате PDF 252 KB...
06 10 2020 12:48:48
Статья в формате PDF 112 KB...
05 10 2020 3:25:21
Статья в формате PDF 107 KB...
04 10 2020 11:45:51
Статья в формате PDF 101 KB...
03 10 2020 19:26:33
Статья в формате PDF 111 KB...
02 10 2020 13:32:12
Еще:
Обзоры -1 :: Обзоры -2 :: Обзоры -3 :: Обзоры -4 :: Обзоры -5 :: Обзоры -6 :: Обзоры -7 :: Обзоры -8 :: Обзоры -9 :: Обзоры -10 :: Обзоры -11 ::
Последовательность подготовки научной работы может быть такой: