МЕТОД проточнОЙ цитометриИ В ДиагностикЕ диссеминированных опухолевых клеток в костном мозге У БОЛЬНЫХ ракОМ молочной железы
Источник:
1 ФГБОУ ВПО Ульяновский государственный университет2 ГУЗ Областной клинический онкологический диспансер3 ФГБУ «Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина» Статья в формате PDF 261 KB
Диагностика гематогенного распространения эпителиальных опухолей на ранних стадиях – одна из главных проблем современной онкологии. В клинической практике пока не найдено рутинных методов обнаружения микрометастазов. Морфологически единичные разрозненные опухолевые клетки не определяются – требуется применение высокочувствительных иммунологических методов. Накапливаются данные о том, что количественное определение и характеристика диссеминированных опухолевых клеток позволяет получить важную прогностическую информацию и проводить мониторинг эффективности терапии. Для того чтобы контролировать эффективность воздействия лекарственных средств на микрометастазы нужно, в первую очередь, стандартизировать методы количественной оценки единичных диссеминированных опухолевых клеток.
Целью настоящей работы явилось установление степени гематогенной диссеминации у больных раком молочной железы (РМЖ) на основании обнаружения диссеминированных опухолевых клеток в костном мозге методом проточной цитометрии с применением моноклональных антител к эпителиальным антигенам.
Материалы и методы исследования. В работе использованы материалы клинического, морфологического, иммуноцитологического обследования 38 больных РМЖ, находящихся на лечении в ГУЗ Областной клинический онкологический диспансер г. Ульяновска с ноября 2011 г. по настоящее время. В исследуемую группы вошли женщины в возрасте от 33 до 74 лет. Средний возраст составил 56 ± 10,0 лет. На момент постановки первичного диагноза пациентки распределились по стадиям следующим образом: I стадия была диагностирована у 3 (7,9 %) больных, IIА – у 11 (29,0 %), IIВ – у 3 (7,9 %), IIIА – у 7 (18,4 %), IIIВ – у 3 (7,9 %), IIIC – у 6 (15,8 %) и IV – у 5 (13,1 %) пациенток. Наиболее частым гистологическим вариантом был инфильтративный смешанный рак (42,9 %). Отмечена достаточно высокая частота инфильтративного протокового рака (28,6 %). Реже встречались инфильтративный дольковый рак (21,4 %) и другие формы рака (медуллярный, папиллярный, тубулярный) – 7,1 %. Больным было проведено стандартное клиническое обследование. Исследование костного мозга до начала лечения выполнялось как стандартными цитологическим и гистологическим методами, так и методом проточной цитометрии с применением моноклональных антител к цитокератинам EpCAM (CD326). Материал для цитологического исследования и проточной цитометрии получали с помощью стернальной пункции. Объем костномозгового пунктата не превышал 0,5 мл, т.к. при большем объеме возможно разбавление образца периферической кровью. Проточная цитометрия проводилась на базе лаборатории иммунологии гемопоэза ФГБУ «Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина» РАМН (руководитель – д.м.н., проф. Н.Н. Тупицын). Исследование проводилось в координатах CD45/CD326. Предварительно было проведено иммуномагнитное обогащение клеток, связывающих антитела CD326 (EpCAM). Это позволило оценивать до 50 млн миелокариоцитов у одного больного. Для сравнения, иммуноцитологически на цитоцентрифужных препаратах можно оценить обычно 1–2 млн. миелокариоцитов. Подсчет клеточности костного мозга и анализ миелограмм производился в клинической лаборатории. Для гистологического исследования выполнялась трепанбиопсия задне-верхней ости подвздошной кости с двух сторон.
Результаты исследования. При стандартном цитологическом исследовании метастазы в костный мозг были выявлены у 1 (2,6 %) из 38 больных. Это пациентка, у которой IV клиническая стадия была установлена до обнаружения метастатических клеток в костном мозге (T4N3cM1, метастазы в печень, плевру). При гистологическом исследовании трепанобиоптатов подвздошной кости у данной больной было выявлено двухстороннее поражение костного мозга. В другом случае исходная стадия заболевания была расценена как IIIC (T4N3aM0), после гистологического обнаружения метастазов в костный мозг было проведено рестадирование – стадия была изменена на IV. При дополнительной остеосцинтиграфии у этой пациентки были выявлены множественные остеопластические метастазы в кости, не подтвержденные рентгенологически. У обеих пациенток метастазы в костный мозг подтверждены с помощью метода проточной цитометрии. Кроме того, у 8 из 38 больных в трепанобиоптатах были обнаружены единичные плазматические клетки или микроочаговое их скопление, что является косвенным признаком поражения костного мозга. При проточной цитометрии у 2 из этих 8 пациенток были обнаружены микрометастазы.
Единичные эпителиальные (опухолевые) клетки в образцах костного мозга были выявлены у 35 (92,1 %) из 38 пациенток с помощью проточной цитометрии с применением моноклональных антител ЕрСАМ (CD326). Важно то, что количество опухолевых клеток, определяемых иммуноцитологически, было очень низким и в 77,1 % случаев составило менее 1 клетки на 1 млн миелокариоцитов. Лишь у 8 (22,9 %) из 35 больных было выявлено от 1 до 10 (в одном случае − 44) эпителиальных клеток на 1 млн миелокариоцитов. У 1 из 8 пациенток была диагностирована I стадия заболевания, у трех пациенток – IIA стадия. У остальных четырех пациенток была установлена IV стадия РМЖ (T4N3сM1), при этом у двух из них было выявлено метастатическое поражение костного мозга в трепанобиоптатах.
Если считать положительной реакцию при наличии 1 метастатической клетки среди 1 миллиона мононуклеарных клеток (МНК) костного мозга (сумма количества лимфоцитов, моноцитов и плазматических клеток), то число таких пациенток составило 31 (88,6 %) из 35. При этом только у 4 (11,4 %) из 35 больных число клеток было ≥ 10. У трех больных было выявлено наибольшее число клеток на 1 млн. МНК – 32, 35 и 330, соответственно. Четкий кластер опухолевых клеток – микрометастаз – при проведении проточной цитометрии был диагностирован у 4 (10,5 %) из 38 пациенток. При этом в 3 из 4 случаев число клеток в образцах костного мозга было очень низким и составило менее 1 клетки на 1 млн миелокариоцитов. Таким образом, метод проточной цитометрии в сочетании с иммуномагнитным обогащением популяции опухолевых клеток позволил диагностировать микрометастазы у 11 (28,9 %) из 38 больных.
Рядом ученых было показано, что количество рецидивов рака молочной железы резко возрастает при обнаружении в костном мозге 10 или 15 изолированных опухолевых клеток. В нашем исследовании не была прослежена общая и безрецидивная выживаемость в связи с небольшим сроком от начала исследования. Выявленные изменения в миелограммах пока не показали ассоциации этих признаков с присутствием отдельных опухолевых клеток в костном мозге. Работа в данном направлении будет продолжена.
Выводы. Возможность выявления единичных опухолевых клеток в костном мозге вследствие большей чувствительности является главным преимуществом метода проточной цитометрии в диагностике диссеминированных опухолевых клеток рака молочной железы в костном мозге по сравнению с морфологическими методами исследования: в 11 (28,9 %) и 2 (5,2 %) случаях из 38, соответственно. В тоже время обнаружение малого количества опухолевых клеток сложно трактовать в тех случаях, где они не формируют четкого кластера. При наличии такого кластера микрометастазы могут быть констатированы даже при наличии менее 1 опухолевой клетки на 1 миллион миелокариоцитов. Нет четких данных о том, какова «критическая» опухолевая нагрузка костного мозга, превышение которой было бы связано с ростом частоты рецидива заболевания. Получение ответов на эти вопросы станет важным шагом на пути к индивидуализации антиметастатической терапии.
Отзывы (через Facebook):
Оставить отзыв с помощью аккаунта FaceBook:
Статья в формате PDF 155 KB...
22 10 2020 19:34:23
Статья в формате PDF 100 KB...
19 10 2020 0:32:57
Статья в формате PDF 91 KB...
18 10 2020 23:19:23
Статья в формате PDF 127 KB...
17 10 2020 10:53:17
Статья в формате PDF 115 KB...
16 10 2020 11:48:51
Статья в формате PDF 110 KB...
15 10 2020 19:57:14
Статья в формате PDF 100 KB...
14 10 2020 15:57:25
Статья в формате PDF 135 KB...
12 10 2020 7:35:48
На основе введённых функций состояния для электромагнитного поля и зарядовой функции состояния для частиц выведена полная система уравнений Максвелла для электродинамики. Показано, что закон сохранения зарядов есть следствие существования этой функции. Показано также, что в вакууме электромагнитное поле отсутствует, что подтверждает справедливость теории дальнодействия. ...
11 10 2020 1:59:16
Статья в формате PDF 99 KB...
09 10 2020 4:50:43
Статья в формате PDF 113 KB...
08 10 2020 21:37:19
Статья в формате PDF 136 KB...
07 10 2020 11:39:58
Представлены породный состав, структура и концентрация поголовья овец в разрезе природно-экономических зон Республики Тыва. ...
05 10 2020 0:51:31
Статья в формате PDF 300 KB...
03 10 2020 3:39:47
Статья в формате PDF 170 KB...
02 10 2020 14:50:23
Статья в формате PDF 109 KB...
01 10 2020 20:39:43
Статья в формате PDF 111 KB...
30 09 2020 2:12:42
Статья в формате PDF 124 KB...
29 09 2020 3:37:19
Статья в формате PDF 137 KB...
28 09 2020 0:25:15
Наши исследования показали, что эффективность профилактики кариеса зубов значительно снижается на фоне вторичных иммунодефицитных состояний ( И Д С), вызванных ортодонтическим аппаратурным лечением. Предлагаемый метод профилактики позволил купировать иммунодефицитное состояние, возникающее на этапах ортодонтического лечения, и повысить эффективность профилактики кариеса зубов. ...
27 09 2020 6:43:26
Статья в формате PDF 271 KB...
26 09 2020 10:31:17
Статья в формате PDF 115 KB...
25 09 2020 5:21:53
Получены сведения о начальных стадиях развития. Согласно профильно-генетической классификации почв техногенных ландшафтов [5] морфологически выделены элювиоземы инициальные, эмбриоземы инициальные и органо-аккумулятивные. Экспериментально показано, что выделение этих типов почв вследствие низкой скорости почвообразования пока возможно только по почвенно-биологическими показателями. Установлено, что микробное сообщество молодых почв на отвалах Мирнинского Г О К имеет характерные черты для начальной стадии почвообразования: более высокую в сравнение зональной почвой численность; низкую активность утилизации целлюлозы; низкую инвентарную. Последнее свидетельствует о низкой скорости формирования органо-минерального комплекса почвы. Выявлено, возможности дифференциации типов молодых техногенных ландшафтов по способу субстратов поддерживать начальный рост тест растений. ...
24 09 2020 2:10:50
В работе приводится анализ мотивации выбора профессии педагога на основе изучения профессиональной ориентации в группе студентов факультета дополнительных профессий С Г П И. ...
23 09 2020 2:55:37
Статья в формате PDF 203 KB...
22 09 2020 10:53:25
После 30 дней адаптации к холоду прессорное действие мезатона на артериальное русло тонкого кишечника уменьшается исключительно за счет снижения чувствительности а1-адренорецепторов на 21 %, а количество активных а1-адренорецепторов нормализовалось. В артериях конечности изменения чувствительности и количества а1-адренорецепторов артерий к мезатону было противоположно кишечнику. Чувствительность а1-адренорецепторов артерий конечности к мезатону нормализовалась и была равна контролю. А количества активных альфа-1-адренорецепторов артерий кожно-мышечной области к мезатону было меньше контроля на 10,3 %. ...
21 09 2020 10:15:55
Статья в формате PDF 136 KB...
20 09 2020 0:33:25
Умелое использование сокровищницы мировой культуры, достойное место в которой занимают поэтические и художественные произведения М. В. Ломоносова, М. И. Алигер, И. В. Гёте, И. А. Ефремова, К. Г. Паустовского, в педагогической практике обеспечивает эффективное развитие естественнонаучного интеллекта и формирование мировоззрения школьников. ...
19 09 2020 9:36:46
Статья в формате PDF 122 KB...
18 09 2020 21:48:41
Статья в формате PDF 79 KB...
17 09 2020 15:47:34
Статья в формате PDF 134 KB...
15 09 2020 0:53:56
Статья в формате PDF 104 KB...
13 09 2020 7:35:10
Статья в формате PDF 110 KB...
12 09 2020 9:24:36
Статья в формате PDF 164 KB...
11 09 2020 21:14:57
Статья в формате PDF 118 KB...
09 09 2020 7:42:18
Статья в формате PDF 90 KB...
08 09 2020 9:23:54
Статья в формате PDF 103 KB...
07 09 2020 18:28:26
Статья в формате PDF 90 KB...
06 09 2020 13:33:41
Статья в формате PDF 98 KB...
04 09 2020 14:23:34
Статья в формате PDF 252 KB...
03 09 2020 20:51:30
Статья в формате PDF 260 KB...
02 09 2020 7:51:56
Статья в формате PDF 131 KB...
31 08 2020 9:56:13
Статья в формате PDF 128 KB...
30 08 2020 19:18:57
Статья в формате PDF 111 KB...
29 08 2020 11:21:38
Статья в формате PDF 163 KB...
28 08 2020 6:52:46
Статья в формате PDF 124 KB...
26 08 2020 16:58:37
Статья в формате PDF 225 KB...
25 08 2020 4:42:55
Статья в формате PDF 119 KB...
24 08 2020 7:33:51
Статья в формате PDF 101 KB...
23 08 2020 3:36:28
Статья в формате PDF 122 KB...
22 08 2020 0:54:31
Статья в формате PDF 151 KB...
21 08 2020 9:29:10
Статья в формате PDF 172 KB...
20 08 2020 16:11:39
Статья в формате PDF 116 KB...
19 08 2020 14:37:51
Статья в формате PDF 125 KB...
18 08 2020 11:27:34
Статья в формате PDF 152 KB...
17 08 2020 9:30:52
Статья в формате PDF 103 KB...
16 08 2020 7:21:31
В работе представлены результаты исследования влияния высокоинтенсивных физических факторов электрического поля коронного разряда ( Э П К Р), создаваемого установкой « Экран», и некогерентных световых импульсов ( Н С И), создаваемых установкой « Стимул» [1, 2], на семена овощных культур, с целью повышения урожайности. По результатам исследования выявлено, что все использованные в эксперименте режимы высокоинтенсивного физического воздействия на семена овощных культур оказывают стимулирующий биологический эффект при оценке урожайности. Определено, что наиболее эффективными режимами Э П К Р для повышения урожайности овощных культур являются режимы с напряженностью электрического поля 3,5 к В/см и 5 к В/см. Выявлено, что наиболее эффективными режимами Н С И для повышения урожайности овощных культур является режим с запасенной суммарной электрической энергией импульсного источника энерго-питания 80 к Дж. Показано, что при воздействии на посадочный материал картофеля Н С И с запасенной суммарной электрической энергией 40 к Дж наблюдается стимулирование роста, развития, повышение всхожести и сокращение вегетационного периода картофеля. Кроме того, данное физическое воздействие вызывает повышение качества урожая картофеля, т.к. вес и количество крупных и средних клубней в опытной группе значительно больше, чем в контрольной. ...
15 08 2020 19:22:38
Статья в формате PDF 87 KB...
14 08 2020 21:55:32
Статья в формате PDF 107 KB...
13 08 2020 18:51:50
Статья в формате PDF 114 KB...
12 08 2020 10:52:37
Статья в формате PDF 121 KB...
11 08 2020 17:35:35
Статья в формате PDF 111 KB...
10 08 2020 23:48:39
Статья в формате PDF 170 KB...
09 08 2020 19:11:54
Статья в формате PDF 101 KB...
08 08 2020 17:30:46
Статья в формате PDF 107 KB...
07 08 2020 2:48:24
Статья в формате PDF 120 KB...
06 08 2020 13:56:46
Статья в формате PDF 109 KB...
05 08 2020 5:23:33
Статья в формате PDF 119 KB...
04 08 2020 2:35:41
Статья в формате PDF 111 KB...
03 08 2020 18:18:31
Статья в формате PDF 114 KB...
02 08 2020 18:10:12
Статья в формате PDF 132 KB...
01 08 2020 8:24:18
Статья в формате PDF 94 KB...
31 07 2020 14:15:22
Статья в формате PDF 123 KB...
30 07 2020 8:10:59
Статья в формате PDF 124 KB...
29 07 2020 4:57:48
Цитомегаловирусная инфекция ( Ц М В И) относится к числу самых распространенных вирусных заболеваний. Наиболее уязвимыми являются плод и новорожденный. Целью данного исследования явилась ранняя диагностика нарушений внутриутробного состояния плода у беременных с Ц М В И. Благодаря разработке новой ультразвуковой аппаратуры, основанной на эффекте Допплера проводились исследования кровотока в магистральных сосудах, а именно маточных артериях. Согласно поставленной цели по разработанной нами методике были рассмотрены анкеты клинико-лабораторного исследования у беременных с Ц М В И. Всего обследовано 115 женщин с различными сроками беременности и 40, составляющих контрольную группу. Из общего числа беременных у 64 (55,7 %) Ц М В И протекала в легкой форме, первично-латентную инфекцию наблюдали у 48 (41,7 %) пациенток. Ультразвуковое сканирование проводилось в разные сроки беременности, преимущественно во II-III триместрах, однако, по показаниям в некоторых случаях У З И осуществляли и в более ранние сроки. Исследование проводилось на аппарате «Aloka» 1700 SSD с допплерометрическим блоком пульсирующей волны, с использованием трансдьюсеров 3,5 и 5 м Гц и трансвагинальным датчиком 6,5 м Гц. При допплерографии в акушерстве применяется качественный анализ кривых скоростей кровотока ( К С К). Определяются систоло-диастолическое соотношение ( С Д О), индекс резистентности ( И Р), пульсовый индекс ( П И). В нашем исследовании наиболее неблагоприятным признаком явилось появление дикротической выемки на фоне двухстороннего нарушения маточно-плацентарного кровотока. У беременных с латентной формой Ц М В И нами выявлена также ассиметрия маточно-плацентарного кровотока. Изменение кровотока в правой М А более выражено, что, по-видимому связано с наличием плацентации одноименной стороны. Снижение маточно-плацентарного кровотока в правой М А постепенно приводит к снижению в левой М А, и связано с наличием морфологических изменений в плаценте. Более выраженные нарушения маточно-плацентарного кровотока встретились у беременных с С З Р П. Из этого следует, что основная причина гипотрофии – это нарушение маточно-плацентарного кровотока. ...
28 07 2020 13:49:14
Статья в формате PDF 172 KB...
27 07 2020 1:38:38
Статья в формате PDF 192 KB...
26 07 2020 6:13:21
Статья в формате PDF 179 KB...
25 07 2020 6:16:10
Статья в формате PDF 103 KB...
24 07 2020 16:14:41
Статья в формате PDF 120 KB...
23 07 2020 3:44:30
Статья в формате PDF 103 KB...
22 07 2020 9:40:56
Статья в формате PDF 139 KB...
19 07 2020 20:19:10
Статья в формате PDF 124 KB...
18 07 2020 9:19:26
Статья в формате PDF 241 KB...
17 07 2020 7:39:17
Статья в формате PDF 115 KB...
16 07 2020 0:46:29
Статья в формате PDF 115 KB...
15 07 2020 23:21:59
Статья в формате PDF 99 KB...
13 07 2020 18:43:52
Статья в формате PDF 277 KB...
12 07 2020 6:16:45
Статья в формате PDF 269 KB...
11 07 2020 18:43:52
Статья в формате PDF 132 KB...
10 07 2020 21:40:35
Статья в формате PDF 242 KB...
09 07 2020 0:48:17
Статья в формате PDF 119 KB...
08 07 2020 7:44:21
Статья в формате PDF 202 KB...
07 07 2020 19:10:19
В статье описана и исследована методами математической статистики хронологическая аномалия космонавтики. Обоснован биномиальный закон распределения числа хронологических совпадений. Показано, что вероятность случайного появления рассматриваемых совпадений весьма мала. Метод исследования, применяемый в работе, преимущественно основан на статистическом анализе хронологии при помощи параметризации дат событий и проверки соответствующего критериального свойства. Используются параметры: условные номера дней с начала летоисчисления N, с начала года n и год Г. Основными информативными параметрами являются интервалы времени между событиями. Обоснован биномиальный закон распределения числа хронологических совпадений. Показано, что вероятность случайного появления рассматриваемых совпадений весьма мала. ...
06 07 2020 7:31:44
Статья в формате PDF 127 KB...
05 07 2020 11:16:41
Статья в формате PDF 94 KB...
04 07 2020 12:38:24
Статья в формате PDF 103 KB...
03 07 2020 0:36:35
Статья в формате PDF 131 KB...
02 07 2020 14:16:14
Статья в формате PDF 169 KB...
01 07 2020 15:31:50
Статья в формате PDF 327 KB...
30 06 2020 8:34:38
Статья в формате PDF 253 KB...
28 06 2020 18:41:55
Понятие время является важнейшим понятием, как физики, так и философии. Актуальность этой проблемы обусловлена тем, что до сих пор, несмотря на широкий круг исследований, не сложилось твердо закрепленного представления о времени. В статье делается попытка раскрыть сущность понятия времени и связать меру времени с движением. За меру времени механического движения предлагается выбрать путь, пройденный, например, концом стрелки часов, участвующей не только в собственном движении относительно циферблата, как это принято, но и в сложном движении, включающем движение часов как целое относительно внешнего наблюдателя. Синхронизация хода часов производится по периодам их движений в соответствие с принятым эталоном времени. Рассматривается случай, когда часы движутся относительно внешнего наблюдателя с постоянной скоростью. Такой подход к проблеме времени позволяет понять его непрерывность и бесконечность. ...
27 06 2020 6:32:21
Статья в формате PDF 314 KB...
26 06 2020 20:35:39
Статья в формате PDF 255 KB...
25 06 2020 1:14:46
Статья в формате PDF 116 KB...
24 06 2020 20:52:35
Статья в формате PDF 258 KB...
23 06 2020 18:37:10
Статья в формате PDF 123 KB...
22 06 2020 7:36:56
Статья в формате PDF 102 KB...
21 06 2020 12:45:55
Статья в формате PDF 86 KB...
20 06 2020 20:47:12
Статья в формате PDF 115 KB...
19 06 2020 5:25:47
Обзор состояния кормления и причин падежа молодняка лисиц в О О О « Покровское зверохозяйство» Республики Саха ( Якутия) в 2010 г. ...
18 06 2020 22:45:33
Статья в формате PDF 146 KB...
17 06 2020 23:46:14
Статья в формате PDF 126 KB...
16 06 2020 23:41:39
Статья в формате PDF 452 KB...
15 06 2020 15:22:55
Статья в формате PDF 296 KB...
14 06 2020 19:16:49
Предложен метод межреберного внутримышечного введения препаратов с непосредственным ультразвуковым «метод глубокого фонофореза», или лазерным воздействием «метод глубокого фотофореза» на место инъекции по рентгенологической проекции воспалительной зоны, и изучены механизмы их лечебного действия у больных деструктивным туберкулезом легких с выраженным пневмофиброзом и патологией органов пищеварения. Создание в очаге туберкулезного поражения повышенной концентрации изониазида повышает эффективность химиотерапии туберкулеза легких в условиях выраженного пневмофиброза изученными методами на 18%. ...
12 06 2020 16:19:51
Статья в формате PDF 99 KB...
10 06 2020 17:14:31
Рассматриваются особенности изменения растительности и почв на протяжении пяти историко-экологических этапов трансформации восточноевропейских степей во второй половине голоцена. Получены оценки поступающей в почву фитомассы, величина изымаемой продукции (в массовом выражении и через энергетические эквиваленты), а также величины энергии, формируемой в процессе гумусообразования. Установлено, что за 5000 лет отношение энергии расхода-прихода растительного вещества изменилось от 1:28 до 1:0,4, а ежегодное поступление гумуса в почвы снизилось с 5,4 до 1,6 М Дж/кв. м. ...
09 06 2020 10:51:14
Статья в формате PDF 125 KB...
08 06 2020 13:34:53
Статья в формате PDF 86 KB...
07 06 2020 6:13:46
Статья в формате PDF 143 KB...
06 06 2020 0:29:53
Статья в формате PDF 90 KB...
05 06 2020 12:49:44
Статья в формате PDF 118 KB...
04 06 2020 19:44:28
Статья в формате PDF 115 KB...
03 06 2020 23:21:22
Статья в формате PDF 257 KB...
02 06 2020 7:55:50
Статья в формате PDF 109 KB...
01 06 2020 8:50:37
Статья в формате PDF 147 KB...
30 05 2020 9:53:29
Статья в формате PDF 259 KB...
29 05 2020 9:16:47
Статья в формате PDF 103 KB...
27 05 2020 14:19:51
Статья в формате PDF 120 KB...
26 05 2020 0:40:53
Еще:
Обзоры -1 :: Обзоры -2 :: Обзоры -3 :: Обзоры -4 :: Обзоры -5 :: Обзоры -6 :: Обзоры -7 :: Обзоры -8 :: Обзоры -9 :: Обзоры -10 :: Обзоры -11 ::
Последовательность подготовки научной работы может быть такой: