МЕТОД проточнОЙ цитометриИ В ДиагностикЕ диссеминированных опухолевых клеток в костном мозге У БОЛЬНЫХ ракОМ молочной железы
1 ФГБОУ ВПО Ульяновский государственный университет2 ГУЗ Областной клинический онкологический диспансер3 ФГБУ «Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина» Статья в формате PDF 261 KB
Диагностика гематогенного распространения эпителиальных опухолей на ранних стадиях – одна из главных проблем современной онкологии. В клинической практике пока не найдено рутинных методов обнаружения микрометастазов. Морфологически единичные разрозненные опухолевые клетки не определяются – требуется применение высокочувствительных иммунологических методов. Накапливаются данные о том, что количественное определение и характеристика диссеминированных опухолевых клеток позволяет получить важную прогностическую информацию и проводить мониторинг эффективности терапии. Для того чтобы контролировать эффективность воздействия лекарственных средств на микрометастазы нужно, в первую очередь, стандартизировать методы количественной оценки единичных диссеминированных опухолевых клеток.
Целью настоящей работы явилось установление степени гематогенной диссеминации у больных раком молочной железы (РМЖ) на основании обнаружения диссеминированных опухолевых клеток в костном мозге методом проточной цитометрии с применением моноклональных антител к эпителиальным антигенам.
Материалы и методы исследования. В работе использованы материалы клинического, морфологического, иммуноцитологического обследования 38 больных РМЖ, находящихся на лечении в ГУЗ Областной клинический онкологический диспансер г. Ульяновска с ноября 2011 г. по настоящее время. В исследуемую группы вошли женщины в возрасте от 33 до 74 лет. Средний возраст составил 56 ± 10,0 лет. На момент постановки первичного диагноза пациентки распределились по стадиям следующим образом: I стадия была диагностирована у 3 (7,9 %) больных, IIА – у 11 (29,0 %), IIВ – у 3 (7,9 %), IIIА – у 7 (18,4 %), IIIВ – у 3 (7,9 %), IIIC – у 6 (15,8 %) и IV – у 5 (13,1 %) пациенток. Наиболее частым гистологическим вариантом был инфильтративный смешанный рак (42,9 %). Отмечена достаточно высокая частота инфильтративного протокового рака (28,6 %). Реже встречались инфильтративный дольковый рак (21,4 %) и другие формы рака (медуллярный, папиллярный, тубулярный) – 7,1 %. Больным было проведено стандартное клиническое обследование. Исследование костного мозга до начала лечения выполнялось как стандартными цитологическим и гистологическим методами, так и методом проточной цитометрии с применением моноклональных антител к цитокератинам EpCAM (CD326). Материал для цитологического исследования и проточной цитометрии получали с помощью стернальной пункции. Объем костномозгового пунктата не превышал 0,5 мл, т.к. при большем объеме возможно разбавление образца периферической кровью. Проточная цитометрия проводилась на базе лаборатории иммунологии гемопоэза ФГБУ «Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина» РАМН (руководитель – д.м.н., проф. Н.Н. Тупицын). Исследование проводилось в координатах CD45/CD326. Предварительно было проведено иммуномагнитное обогащение клеток, связывающих антитела CD326 (EpCAM). Это позволило оценивать до 50 млн миелокариоцитов у одного больного. Для сравнения, иммуноцитологически на цитоцентрифужных препаратах можно оценить обычно 1–2 млн. миелокариоцитов. Подсчет клеточности костного мозга и анализ миелограмм производился в клинической лаборатории. Для гистологического исследования выполнялась трепанбиопсия задне-верхней ости подвздошной кости с двух сторон.
Результаты исследования. При стандартном цитологическом исследовании метастазы в костный мозг были выявлены у 1 (2,6 %) из 38 больных. Это пациентка, у которой IV клиническая стадия была установлена до обнаружения метастатических клеток в костном мозге (T4N3cM1, метастазы в печень, плевру). При гистологическом исследовании трепанобиоптатов подвздошной кости у данной больной было выявлено двухстороннее поражение костного мозга. В другом случае исходная стадия заболевания была расценена как IIIC (T4N3aM0), после гистологического обнаружения метастазов в костный мозг было проведено рестадирование – стадия была изменена на IV. При дополнительной остеосцинтиграфии у этой пациентки были выявлены множественные остеопластические метастазы в кости, не подтвержденные рентгенологически. У обеих пациенток метастазы в костный мозг подтверждены с помощью метода проточной цитометрии. Кроме того, у 8 из 38 больных в трепанобиоптатах были обнаружены единичные плазматические клетки или микроочаговое их скопление, что является косвенным признаком поражения костного мозга. При проточной цитометрии у 2 из этих 8 пациенток были обнаружены микрометастазы.
Единичные эпителиальные (опухолевые) клетки в образцах костного мозга были выявлены у 35 (92,1 %) из 38 пациенток с помощью проточной цитометрии с применением моноклональных антител ЕрСАМ (CD326). Важно то, что количество опухолевых клеток, определяемых иммуноцитологически, было очень низким и в 77,1 % случаев составило менее 1 клетки на 1 млн миелокариоцитов. Лишь у 8 (22,9 %) из 35 больных было выявлено от 1 до 10 (в одном случае − 44) эпителиальных клеток на 1 млн миелокариоцитов. У 1 из 8 пациенток была диагностирована I стадия заболевания, у трех пациенток – IIA стадия. У остальных четырех пациенток была установлена IV стадия РМЖ (T4N3сM1), при этом у двух из них было выявлено метастатическое поражение костного мозга в трепанобиоптатах.
Если считать положительной реакцию при наличии 1 метастатической клетки среди 1 миллиона мононуклеарных клеток (МНК) костного мозга (сумма количества лимфоцитов, моноцитов и плазматических клеток), то число таких пациенток составило 31 (88,6 %) из 35. При этом только у 4 (11,4 %) из 35 больных число клеток было ≥ 10. У трех больных было выявлено наибольшее число клеток на 1 млн. МНК – 32, 35 и 330, соответственно. Четкий кластер опухолевых клеток – микрометастаз – при проведении проточной цитометрии был диагностирован у 4 (10,5 %) из 38 пациенток. При этом в 3 из 4 случаев число клеток в образцах костного мозга было очень низким и составило менее 1 клетки на 1 млн миелокариоцитов. Таким образом, метод проточной цитометрии в сочетании с иммуномагнитным обогащением популяции опухолевых клеток позволил диагностировать микрометастазы у 11 (28,9 %) из 38 больных.
Рядом ученых было показано, что количество рецидивов рака молочной железы резко возрастает при обнаружении в костном мозге 10 или 15 изолированных опухолевых клеток. В нашем исследовании не была прослежена общая и безрецидивная выживаемость в связи с небольшим сроком от начала исследования. Выявленные изменения в миелограммах пока не показали ассоциации этих признаков с присутствием отдельных опухолевых клеток в костном мозге. Работа в данном направлении будет продолжена.
Выводы. Возможность выявления единичных опухолевых клеток в костном мозге вследствие большей чувствительности является главным преимуществом метода проточной цитометрии в диагностике диссеминированных опухолевых клеток рака молочной железы в костном мозге по сравнению с морфологическими методами исследования: в 11 (28,9 %) и 2 (5,2 %) случаях из 38, соответственно. В тоже время обнаружение малого количества опухолевых клеток сложно трактовать в тех случаях, где они не формируют четкого кластера. При наличии такого кластера микрометастазы могут быть констатированы даже при наличии менее 1 опухолевой клетки на 1 миллион миелокариоцитов. Нет четких данных о том, какова «критическая» опухолевая нагрузка костного мозга, превышение которой было бы связано с ростом частоты рецидива заболевания. Получение ответов на эти вопросы станет важным шагом на пути к индивидуализации антиметастатической терапии.
Отзывы (через Facebook):
Оставить отзыв с помощью аккаунта FaceBook:
Предложен новый подход к построению педагогической системы учителя. Выделена ее основная цель: формирование навыка понимания. Предложен путь ее реализации, включающий согласование целей обучения, разработку новой программы и новых форм и методов обучения. Выявлены некоторые трудности обучения, затрудняющие формирование навыка понимания. ...
21 01 2020 12:14:21
Статья в формате PDF 263 KB...
20 01 2020 19:13:47
Рассматриваются показатели видового разнообразия мелких млекопитающих в зоне влияния алмазодобывающей промышленности Западной Якутии. Исследования проводились на территории двух крупных промышленных узлов – Мирнинского (среднетаежная подзона) и Айхало- Удачнинского (северотаежная подзона). Отработано около 7040 конусо-суток, 4700 ловушко-суток и отловлено 1920 экз. мелких млекопитающих, относящихся к 17 видам. Отмечено, что при масштабных преобразованиях ландшафтов, характерных для деятельности предприятий горнодобывающей промышленности, происходят изменения состава сообществ и популяционных параметров мелких млекопитающих, что свидетельствует о пессимизации среды обитания. Причем негативные трансформации более резко выражены в пределах северотаежной подзоны. ...
19 01 2020 7:15:40
Статья в формате PDF 104 KB...
18 01 2020 18:17:16
Статья в формате PDF 245 KB...
17 01 2020 22:25:51
Статья в формате PDF 112 KB...
16 01 2020 18:27:21
Статья в формате PDF 111 KB...
15 01 2020 22:32:12
Статья в формате PDF 118 KB...
14 01 2020 6:41:17
Проведен анализ общепринятых учений и научных теорий, имевших широкую аудиторию в вузах и научно-исследовательских институтах прошлого века. Выявлена недостаточность абстрактной потенции в мыслительной жизни homo sensus, главная альтернатива которой – эмоциональный мир, чувственность и вера. Свойство верить познающего субъекта не носит характер религиозности, однако имеет общие с ней основания. Роднит религию и научную веру стремление не понять, а принять смутные представления, сулящие сиюминутную пользу и выгоду, объединяет желание увидеть в таинственном и запредельном нечто к себе доброжелательное, освобождающее от мучительного предназначения думать и, следовательно, уводящее от необходимости работать – работать без самообмана, но эффективно и достойно homo sapiens. ...
13 01 2020 19:58:42
В работе впервые приведены сведения об особенностях аудиогенной чувствительности и поведения в «открытом поле» двух групп крыс, гомозиготных по локусу TAG 1A DRD2. ...
12 01 2020 20:54:37
Статья в формате PDF 123 KB...
11 01 2020 12:51:15
Статья в формате PDF 137 KB...
10 01 2020 22:58:13
Статья в формате PDF 109 KB...
09 01 2020 12:48:40
Статья в формате PDF 106 KB...
08 01 2020 16:17:21
Статья в формате PDF 146 KB...
07 01 2020 20:20:34
Статья в формате PDF 123 KB...
06 01 2020 22:52:35
На материале 769 клинических наблюдений проведен анализ причин возникновения острого панкреатита после эндоскопической папиллотомии. Установлено, что основой их развития является прямое повреждение главного протока поджелудочной железы. Разработаны способы профилактики постманипуляционных панкреатитов. ...
05 01 2020 8:18:26
В статье показано увеличение интереса граждан России к истории и культуре стран ислама. Это связано с повышением политической активности этих стран и расширением их туристического сервиза. ...
03 01 2020 6:18:30
Статья в формате PDF 125 KB...
02 01 2020 22:54:35
Обсуждаются возможности использования микроскопических почвенных водорослей при оценке качества окружающей среды. Показано, что в качестве критериев при прогнозировании антропогенной нагрузки на наземные экосистемы можно использовать изменение видового состава и численности почвенных водорослей. ...
01 01 2020 23:56:30
Статья в формате PDF 109 KB...
31 12 2019 4:18:15
Статья в формате PDF 130 KB...
30 12 2019 17:39:31
Статья в формате PDF 99 KB...
29 12 2019 14:26:40
Статья в формате PDF 99 KB...
28 12 2019 9:46:10
Статья в формате PDF 124 KB...
25 12 2019 8:45:10
Статья в формате PDF 266 KB...
24 12 2019 19:40:25
Статья в формате PDF 118 KB...
23 12 2019 13:24:14
Статья в формате PDF 140 KB...
22 12 2019 23:11:57
Статья в формате PDF 109 KB...
21 12 2019 14:19:47
Статья в формате PDF 464 KB...
17 12 2019 8:28:39
Среди населения Ширванской зоны Азербайджана проведены медико-генетические исследования по выявлению нарушений Ц Н С и органов чувств, установлены типы наследования патологий. Среди 119 больных с 14 наследственными и врожденными заболеваниями 71,43 % приходится на моногенные патологии с аутосомно-рецессивным типом наследования, что объясняется кровнородственными браками среди родителей пробандов. ...
16 12 2019 20:54:58
Статья в формате PDF 263 KB...
15 12 2019 20:32:32
Статья в формате PDF 206 KB...
14 12 2019 9:30:45
Статья в формате PDF 106 KB...
13 12 2019 3:47:29
Статья в формате PDF 112 KB...
12 12 2019 7:36:42
Статья в формате PDF 250 KB...
11 12 2019 3:48:24
Статья в формате PDF 119 KB...
09 12 2019 5:49:56
Статья в формате PDF 113 KB...
08 12 2019 16:46:40
Статья в формате PDF 264 KB...
06 12 2019 6:57:56
Статья в формате PDF 112 KB...
05 12 2019 15:40:46
Статья в формате PDF 97 KB...
04 12 2019 18:12:37
Статья в формате PDF 448 KB...
03 12 2019 10:29:38
Статья в формате PDF 102 KB...
02 12 2019 15:34:39
Исторический аспект развития студенческого самоуправления в дореволюционный, советский и переходный периоды России показали, что будущее страны на современном этапе определяется тем, каким образом будут осуществлены воспитание и подготовка квалифицированной рабочей силы, готовой к постоянному профессиональному росту, социальной и профессиональной мобильности. Одним из важных стимулов повышения гражданской, патриотической и социальной активности будущих специалистов являются восстановление, наличие и дальнейшее развитие и совершенствование таких демократических институтов в студенческой среде как соуправление и самоуправление. ...
01 12 2019 12:27:54
Статья в формате PDF 123 KB...
30 11 2019 10:57:59
Статья в формате PDF 108 KB...
29 11 2019 0:37:23
Статья в формате PDF 118 KB...
28 11 2019 14:42:58
Статья в формате PDF 104 KB...
27 11 2019 17:29:11
Статья в формате PDF 269 KB...
26 11 2019 0:58:29
Статья в формате PDF 292 KB...
25 11 2019 6:53:33
Статья в формате PDF 270 KB...
23 11 2019 10:30:59
Статья в формате PDF 111 KB...
22 11 2019 16:43:38
Статья в формате PDF 110 KB...
21 11 2019 21:41:10
Статья в формате PDF 112 KB...
20 11 2019 17:42:55
Статья в формате PDF 104 KB...
19 11 2019 22:15:36
Статья в формате PDF 119 KB...
17 11 2019 11:55:13
Статья в формате PDF 251 KB...
16 11 2019 21:25:21
Статья в формате PDF 109 KB...
15 11 2019 23:22:30
Статья в формате PDF 239 KB...
14 11 2019 8:28:40
Авторами проведено комплексное исследование сосудистых и нервных структур всего органокомплекса брюшной полости, что позволило подтвердить общие морфологические закономерности, свойственные млекопитающим отряда хищных, выявить характерные видовые и внутривидовые особенности васкуляризации и иннервации у пушных зверей клеточного содержания. Полученные новые данные о морфологии сосудистых и нервных образований органов брюшной полости млекопитающих являются оригинальными и дают не только полное представление об изученных структурах, но позволяют морфофункционально интерпретировать адаптогенные процессы, протекающие в интегративно-координационных системах организма пушных зверей, находящихся под интенсивным антропогенным воздействием в процессе доместикации. ...
12 11 2019 10:10:56
Статья в формате PDF 113 KB...
11 11 2019 10:25:14
Статья в формате PDF 168 KB...
10 11 2019 18:48:50
Статья в формате PDF 130 KB...
09 11 2019 8:21:48
Статья в формате PDF 115 KB...
08 11 2019 10:49:23
Статья в формате PDF 253 KB...
07 11 2019 5:22:43
Статья в формате PDF 288 KB...
06 11 2019 14:45:16
Статья в формате PDF 242 KB...
05 11 2019 0:10:15
Статья в формате PDF 120 KB...
04 11 2019 1:21:45
Статья в формате PDF 131 KB...
03 11 2019 21:37:19
Статья в формате PDF 111 KB...
02 11 2019 17:59:22
Статья в формате PDF 132 KB...
01 11 2019 15:57:53
Статья в формате PDF 100 KB...
31 10 2019 10:37:26
Статья в формате PDF 121 KB...
30 10 2019 12:33:30
Проведена инвентаризация лихенофлоры Республики Татарстан ( Р Т). Показана роль особо охраняемых природных территорий в сохранении флористического разнообразия. Дан спектр семейств редких видов во флоре обследованной территории и анализ состава географических элементов. Рассмотрено распределение редких видов по основным типам местообитаний. Даются некоторые сведения о редких и исчезающих лишайниках для включения в Красную книгу Р Т. ...
29 10 2019 10:56:47
Статья в формате PDF 136 KB...
28 10 2019 5:12:32
Статья в формате PDF 156 KB...
27 10 2019 6:25:28
Стратегия социально-экономического развития Р Ф поставило на государственном уровне вопрос о достижении нового качества общего образования – готовности и способности учащихся к непрерывному образованию. В настоящее время в соответствии с основными тенденциями развития современного образования меняются целевые, процессуальные и результативные компоненты учебно-воспитательного процесса и прежде всего в начальной школе. ...
26 10 2019 6:51:17
Статья в формате PDF 139 KB...
25 10 2019 8:41:50
Статья в формате PDF 418 KB...
23 10 2019 13:28:33
Статья в формате PDF 119 KB...
22 10 2019 9:17:19
Статья в формате PDF 126 KB...
21 10 2019 21:29:12
Статья в формате PDF 110 KB...
19 10 2019 18:56:22
Статья в формате PDF 282 KB...
18 10 2019 12:12:44
Статья в формате PDF 135 KB...
16 10 2019 12:12:51
Статья в формате PDF 127 KB...
13 10 2019 12:15:45
Статья в формате PDF 236 KB...
12 10 2019 1:30:16
Статья в формате PDF 110 KB...
11 10 2019 13:59:30
Статья в формате PDF 297 KB...
10 10 2019 16:11:20
Статья в формате PDF 109 KB...
09 10 2019 2:13:57
Обследовано 19 здоровых людей и 33 пациента с описторхозом и холелитиазом. Проведена сравнительная оценка некоторых показателей холестеринового, пигментного, белкового обмена в пузырной и печеночной порции желчи у обследованных пациентов до и после терапии бильтрицидом и урсосаном. Выявлено, что у пациентов с описторхозом и холелитиазом в эффективные сроки после монотерапии бильтрицидом отмечается значимое превышение концентрации непрямого билирубина, холестерина и белка в пузырной желчи по сравнению со здоровыми людьми, что свидетельствует о сохранении остаточных явлений при значительном улучшении пигментного обмена и снижении литогенных свойств желчи. Включение в схему подготовки и проведения антигельминтной терапии урсосана позволяет достигнуть наибольшего гиполитогенного состояния пузырной порции желчи в эффективные сроки после терапии бильтрицидом. ...
08 10 2019 19:12:34
Статья в формате PDF 113 KB...
07 10 2019 15:19:48
Статья в формате PDF 199 KB...
06 10 2019 22:48:41
Статья в формате PDF 463 KB...
05 10 2019 4:45:33
Статья в формате PDF 150 KB...
04 10 2019 15:40:45
Статья посвящена вопросам изучения антимикробных свойств природных биологически активных соединений – флавоноидов и фенолкарбоновых кислот, извлекаемых методом вихревой турбоэкстракции из сырья растений рода Veronica L. (сем. Scrophulariaceae Juss.) Предуралья. На основании проведенного исследования авторы делают вывод о возможности применения растительного сырья Veronica L. в медицинской практике. ...
03 10 2019 18:45:32
Статья в формате PDF 263 KB...
02 10 2019 3:57:20
Статья в формате PDF 123 KB...
01 10 2019 23:20:36
Статья в формате PDF 132 KB...
30 09 2019 13:51:31
Статья в формате PDF 276 KB...
29 09 2019 15:17:56
Статья в формате PDF 273 KB...
28 09 2019 21:14:18
Статья в формате PDF 106 KB...
26 09 2019 12:42:22
Статья в формате PDF 122 KB...
25 09 2019 7:36:39
Статья в формате PDF 110 KB...
24 09 2019 10:57:36
В эксперименте на половозрелых крысах Wistar исследованы особенности регенерации суставного хряща коленного сустава после имплантации в зону повреждения гранулированного минерального компонента костного матрикса ( М К К М), полученного по оригинальной технологии. Установлено, что М К К М имеет упорядоченную высокопористую структуру, близкую к естественной архитектонике костного матрикса и химический состав, соответствующий минеральному составу кости. М К К М обладает выраженными хондро- и остеиндуктивными свойствами, обеспечивает пролонгированную активизацию репаративного процесса, ускоренное органотипическое ремоделирование и восстановление поврежденного суставного хряща. ...
23 09 2019 8:42:54
Статья в формате PDF 110 KB...
22 09 2019 18:27:30
Статья в формате PDF 314 KB...
20 09 2019 12:47:20
Статья в формате PDF 214 KB...
19 09 2019 8:15:19
Статья в формате PDF 113 KB...
18 09 2019 3:19:19
Статья в формате PDF 108 KB...
17 09 2019 21:15:49
Статья в формате PDF 109 KB...
16 09 2019 13:44:16
Статья в формате PDF 150 KB...
15 09 2019 17:43:10
Статья в формате PDF 127 KB...
14 09 2019 4:24:41
Статья в формате PDF 117 KB...
13 09 2019 8:32:39
Статья в формате PDF 124 KB...
12 09 2019 8:35:36
Статья в формате PDF 116 KB...
11 09 2019 17:12:41
Статья в формате PDF 117 KB...
09 09 2019 12:43:21
Статья в формате PDF 104 KB...
08 09 2019 2:30:41
Статья в формате PDF 109 KB...
07 09 2019 16:43:43
Статья в формате PDF 90 KB...
06 09 2019 11:59:53
Статья в формате PDF 835 KB...
05 09 2019 11:34:57
Статья в формате PDF 113 KB...
04 09 2019 20:55:40
Статья в формате PDF 121 KB...
03 09 2019 3:36:19
На основании диагностических признаков приводятся доказательства, указывающие на то, что Chytridiomycosis существует в популяциях Rana arvalis на Среднем Урале. Показана методика обнаружения заболевания по аномалиям ротового аппарата личинок и отслеживания динамики частоты встречаемости его в популяции. В экстремальных условиях инфекция поражает ослабленных и ведет к их выбраковке, что приводит к ускорению адаптации популяции в целом в быстро изменяемой среде. ...
02 09 2019 6:35:38
Статья в формате PDF 116 KB...
01 09 2019 20:30:35
Статья в формате PDF 274 KB...
31 08 2019 7:41:27
Статья в формате PDF 346 KB...
30 08 2019 14:42:29
Статья в формате PDF 130 KB...
29 08 2019 11:18:22
Статья в формате PDF 114 KB...
28 08 2019 10:50:13
Статья в формате PDF 126 KB...
27 08 2019 12:32:58
Еще:
Обзоры -1 :: Обзоры -2 :: Обзоры -3 :: Обзоры -4 :: Обзоры -5 :: Обзоры -6 :: Обзоры -7 :: Обзоры -8 :: Обзоры -9 :: Обзоры -10 :: Обзоры -11 ::
Последовательность подготовки научной работы может быть такой: